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離心式去垢劑去除柱

● 產品組成：

● 產品介紹：

離(li)心式去(qu)垢(gou)劑(ji)(ji)去(qu)除(chu)(chu)柱能夠通過離(li)心快速去(qu)除(chu)(chu)蛋(dan)白(bai)溶液(ye)或質(zhi)譜(pu)(pu)分(fen)(fen)析(xi)中(zhong)(zhong)肽(tai)段溶液(ye)中(zhong)(zhong)的(de)常(chang)用去(qu)垢(gou)劑(ji)(ji)，包括離(li)子型去(qu)垢(gou)劑(ji)(ji)，非離(li)子去(qu)垢(gou)劑(ji)(ji)和兩性離(li)子去(qu)垢(gou)劑(ji)(ji)。在(zai)蛋(dan)白(bai)實驗中(zhong)(zhong)，去(qu)垢(gou)劑(ji)(ji)在(zai)促進蛋(dan)白(bai)溶解，增(zeng)加(jia)蛋(dan)白(bai)穩定性以(yi)及阻止蛋(dan)白(bai)聚集方(fang)面都有重要(yao)作用。然而，蛋(dan)白(bai)溶液(ye)中(zhong)(zhong)的(de)去(qu)垢(gou)劑(ji)(ji)會(hui)對下游實驗產生影(ying)響(xiang)，如ELISA，等(deng)(deng)電聚焦以(yi)及質(zhi)譜(pu)(pu)分(fen)(fen)析(xi)等(deng)(deng)。在(zai)質(zhi)譜(pu)(pu)分(fen)(fen)析(xi)中(zhong)(zhong)，去(qu)垢(gou)劑(ji)(ji)會(hui)與肽(tai)段形成(cheng)加(jia)合(he)離(li)子抑(yi)制肽(tai)段離(li)子化，導致m/z值的(de)遷移。因此，質(zhi)譜(pu)(pu)分(fen)(fen)析(xi)中(zhong)(zhong)去(qu)除(chu)(chu)肽(tai)段溶液(ye)中(zhong)(zhong)多余的(de)去(qu)垢(gou)劑(ji)(ji)是(shi)影(ying)響(xiang)分(fen)(fen)析(xi)結(jie)果(guo)的(de)重要(yao)因素。該去(qu)除(chu)(chu)柱可(ke)以(yi)高(gao)效(xiao)（＞95%）去(qu)除(chu)(chu)樣品(pin)中(zhong)(zhong)各種常(chang)用的(de)去(qu)垢(gou)劑(ji)(ji)（濃度范圍1-5%）。

去垢(gou)劑去除柱參數如下(xia)：

● 貯存、運輸和效期：

4℃貯存(cun)（不能冷凍）；常溫運輸(shu)；有效期1年(nian)。

● 操作步驟

一、 去垢劑去除柱預處理：

1.1 取出柱子，放入套(tao)管中。  

1.2 旋(xuan)開(kai)管蓋，不要(yao)擰掉柱子(zi)底部堵頭(tou)，加入0.4 ml 1×PBS，蓋緊管蓋，常溫靜置2 min，活(huo)化(hua)填料。

1.3 擰(ning)掉柱(zhu)子底(di)部堵頭，將柱(zhu)子放入套管中，1000 g 離心1 min，棄流穿液。

注：離心力(li)不(bu)要高于1000 g，過(guo)高的離心力(li)會損傷填料，降(jiang)低去垢劑去除效率(lv)。

1.4在(zai)柱(zhu)子(zi)管蓋上標記(ji)填料在(zai)柱(zhu)子(zi)內(nei)(nei)的傾(qing)斜方向(xiang)，隨后(hou)離(li)心(xin)(xin)步驟(zou)均按(an)同一傾(qing)斜方向(xiang)在(zai)離(li)心(xin)(xin)機內(nei)(nei)放置柱(zhu)子(zi)。

1.5柱子(zi)中加入0.4 ml 1×PBS，1000 g 離心1min，棄流穿液(ye)。至此(ci)，柱子(zi)活化結束，備用。

二、樣品去垢劑去除：

2.1 將柱(zhu)子轉(zhuan)移到2 ml尖底離心管中，加入(ru)25-100 μl待處理(li)樣品(pin)（樣品(pin)濃度高于(yu)0.5 μg/μl），常溫靜置(zhi)2 min。 

2.2 1000g 離心2 min，收集(ji)離心管內樣(yang)品(pin)。

● 注意事項：

1. 去垢劑去除效果：可(ke)以(yi)高效的（＞95%）去除樣品中各種常用的去垢劑（濃度范圍1-5%）。

2. 樣(yang)品處(chu)理(li)(li)體積要在柱子(zi)處(chu)理(li)(li)范圍(wei)內，該去除柱最多(duo)處(chu)理(li)(li)體積是100 μl樣(yang)品，過(guo)多(duo)會導(dao)致收集 

管中液體浸沒(mei)到去除柱。

3. 當樣品濃度(du)過低時（<0.5 μg/μl)，需(xu)先將樣品濃縮到所需(xu)體積或所需(xu)濃度(du)。

● 常見問題：

● 實驗示例：