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EB染色液
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產品編號
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產品名稱
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包裝
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EB001-04
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EB染色液
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10
ml
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說明書
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一份
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● 產品簡介：
EB染色液是EB的水溶液，濃度為10mg/ml。EB（溴化乙錠）能與核酸分子特異結合，用于觀察瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中DNA或RNA分子。廣泛應用于核酸電泳前后的染色以及流式細胞儀的樣品染色處理等。溴化乙錠（Ethidium Bromide；C21H20N3Br；分子量為394.32）含有一個可以嵌入DNA 堿基的三環平面基團。它與DNA 的結合沒有堿基序列特異性。大約每2.5 個堿基插入一個溴化乙錠分子。當染料分子插入后，紫外激發后呈現熒光，可以檢測到10ng 的DNA 條帶。
● 保存、運輸及效期：
常溫避光保存；常溫運輸；有效期兩年。
● 注意事項：
EB有一(yi)定毒(du)性，使用時請(qing)使用一(yi)次性手套(tao)操作，注(zhu)意防護！
● 使用說明：
使用前，先離心快甩EB溶液至管底，以防開蓋后EB造成的污染。
1. 瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色（預染法）：
1. 按照所(suo)需(xu)濃(nong)度稱取瓊脂糖(tang)，加入TAE或TBE緩沖液，在微波爐中加熱至(zhi)徹底溶(rong)解(jie)。
2. 等凝膠(jiao)溫度(du)降至大約50-60℃以(yi)下時，按照稀釋10000倍加入(ru)10 mg/ml EB溶液，如100ml凝膠(jiao)加入(ru)EB量為10 μl；徹(che)底搖勻后鋪膠(jiao)并插入(ru)梳(shu)子。
3. 凝固(gu)后(hou)，將梳子輕(qing)輕(qing)拔出。
4. 上樣電泳，電泳結束后紫(zi)外觀察。
注：預染(ran)法，EB染(ran)色會出(chu)現陰(yin)陽膠現象，即隨(sui)著(zhu)電泳時(shi)間延長，較小(xiao)的片段會染(ran)色不清楚。參見實驗示(shi)例。可以將凝(ning)膠用后染(ran)法染(ran)色即可看到小(xiao)片段條(tiao)帶(dai)。
2. 瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色（后染法）：
1. 按照所需濃度稱取瓊脂(zhi)糖，加入TAE或TBE緩沖液，在(zai)微波爐中加熱至徹(che)底溶(rong)解。
2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下時(shi)，不要(yao)加入EB溶液(ye)，直接鋪(pu)膠并插入梳子(zi)。
3. 凝固后，將梳子輕輕拔出(chu)。
4. 上樣(yang)電泳。
5. 電(dian)泳(yong)結束后(hou)將凝(ning)膠浸(jin)泡在含(han)有(you)EB的TAE或TBE染(ran)色(se)液中（染(ran)色(se)液配制：100ml 緩(huan)沖(chong)液中加入(ru)100-200 μl EB溶液，混勻）染(ran)色(se)15-20分鐘(zhong)；TAE或TBE緩(huan)沖(chong)液中脫色(se)10-15分鐘(zhong)。
6. 紫(zi)外觀察結果。
● 實驗示例：
