首頁 > 細胞生物學 > 細胞組織染色 > 普通染色
伊紅染色液
Eosin Staining Solution
● 產品(pin)組成(cheng):
組分貨號 |
名稱 |
規格 |
貯存 |
EO1016S |
伊紅染色液 |
100 ml |
RT 避光(guang) |
|
說明書 |
一份 |
|
● 產品簡介:
伊紅(Eosin)是一種化學合成的酸性染料,在水中解離成帶負電荷的陰離子,可以和蛋白質氨基上帶正電荷的陽離子結合,可以使細胞胞漿染成不同程度的紅色或粉紅色,而蘇木素染色液能將細胞核染成藍色,與紅色胞漿形成鮮明對比,從而使蘇木素伊紅(HE)染色成為病理組織切片中最廣泛使用的一種常規染色方法。
本染色液可以重復使用,直至認為效果不佳時再換用新的染色液。一個包裝的本染色液至少可以染色200個樣品。
● 貯(zhu)存:
RT避光保存,一年有效。
● 操作步驟:
1. 需要用戶自己準備的試劑
a. 固定液: 4%多聚甲醛固定液。
b. 分化液(5%的乙酸溶液或0.5%的鹽酸乙醇);
c. 如果需要脫水、透明和封片處理,還需自備二甲苯,和封片劑及80%乙醇、90%乙醇、無水乙醇;
d. 70%乙醇。
2. 樣品處理
a. 對于石蠟切片:
二甲苯中脫蠟5-10分鐘。
換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘。
無水乙醇5分鐘。
90%乙醇2分鐘。
80%乙醇2分鐘。
70%乙醇2分鐘。
蒸餾水2分鐘。
b. 對于冰凍切片:
固定液固定10分鐘以上。
蒸餾水2分鐘。
c. 對于培養細胞:
固定液固定10分鐘以上。
蒸餾水洗滌2分鐘。
換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2分鐘。
3. 伊紅染色
對于上述處理好的樣品:
伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據染色結果和要求調整時間)。 此時,如果需要直接觀察,可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續步驟進行,70%乙醇洗滌后仍可按照后續步驟進行脫水、透明和封片處理。
注:如果用于免疫組化等染色后的復染,可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進行伊紅染色。
4. 脫水、透明、封片或進行其它染色
a. 脫水、透明、封片:
70%乙醇10秒,80%乙醇10秒,90%乙醇10秒,無水乙醇10秒。二甲苯透明5分鐘。
換用新鮮的二甲苯,再透明5分鐘。
用中性樹膠或其它封片劑封片。
顯微鏡下觀察,細胞漿呈粉紅色或紅色。
b. 進行其它染色:
如果進行免疫熒光染色,或進行Hoechst等熒光染料的染色,在伊紅染色液染色后: 70%乙醇洗滌2次,每次2分鐘。 PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。 然后就可以進行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。如果免疫熒光染色效果不佳,可能染料對抗體結合有影響,請單獨染色。
|