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溶菌酶溶液(10mg/ml)
● 產品規格:
10 ml
● 產品內容:
名稱 |
貨號 |
規格 |
貯存溫(wen)度 |
運輸溫度 |
溶菌酶 (干粉) |
LS004-01 |
100 mg |
-20℃ |
常溫 |
溶菌酶溶解液 |
LS004-02 |
10 ml |
-20℃ |
常(chang)溫 |
● 保存條件:
未配制的(de)溶(rong)菌酶(mei)干粉和溶(rong)解液-20℃保存(cun),有(you)(you)效期24個月(yue);配制好的(de)溶(rong)液-20℃貯存(cun)有(you)(you)效期12個月(yue)。
● 產品說明:
Lysozyme,中(zhong)文名為溶菌酶(mei),EC Number:3.2.1.17,CAS: 12650-88-3,活性>20KU/mg,純化(hua)自蛋清(egg white),不含DNase、RNase和Protease,可以(yi)用于以(yi)質(zhi)粒抽提(ti)、蛋白純化(hua)等為目(mu)的的細菌裂解。
● 溶液配制方法:
取10 ml溶解液加到溶菌(jun)(jun)酶(mei)干粉(fen)中,徹底溶解,即(ji)配成10 ml(10mg/ml)的溶菌(jun)(jun)酶(mei)溶液,-20℃保存(cun)。
● 使用方法:
細菌裂解:
1. 細菌過夜培養菌液10 ml 12,000 rpm離心 5 min 后,棄上清,盡量棄除殘余培養基,留取管底部菌體。
2. 加入1 ml細菌裂解液,50μl 10mg/ml 溶菌酶溶液,用吸頭吹打至無可見細胞團塊,重懸菌體。
注:此步驟可加入蛋白酶抑制劑如PMSF,保護蛋白,抑制降解;如裂解液比較粘稠,可以加入DNaseI溶液,消化基因組DNA。
3. 37℃孵育20 min,期間輕彈離心管數次以加速裂解。
注:溶菌酶的用量和處理時間與處理的細菌種類密切相關,用戶可以根據細菌種類進行調節。如革蘭氏陽性菌應將處理時間延長到30-60分鐘。
4. 裂解完成后 13,000rpm4℃離(li)心5 min,將上(shang)清(qing)(上(shang)清(qing)中即為可(ke)溶性蛋(dan)白(bai))轉移至新的離(li)心管中,直接進行下一(yi)步純化或(huo)檢測實驗。
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