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膜蛋白重懸液(BN電泳用)
貨號(hao) |
名稱 |
規格 |
PN1020 |
膜(mo)蛋(dan)白重懸液(BN電(dian)泳用) |
5 ml |
● 產品簡介
該產品配套動物膜蛋白(bai)提取試(shi)劑(ji)盒(貨號(hao):RTD8111,RTD8112)和(he)動物線粒體(ti)提取試(shi)劑(ji)盒(貨號(hao):RTD8115,RTD8116)使用。含有終濃度(du)10%甘油,用于膜蛋白(bai)的沉淀(dian)的重(zhong)懸,重(zhong)懸后(hou)的膜蛋白(bai)沉淀(dian)可以(yi)-20℃或-80℃貯存。
● 貯存、效期和運輸:
-20℃貯(zhu)存;一(yi)年有效(xiao);濕(shi)冰運輸。
● 使用方法:
1 膜蛋白BN非變性樣品處理:
1.1 建議(yi)使(shi)用50 μl膜蛋白(bai)重(zhong)懸液(BN電泳用)(貨號:PN1020)重(zhong)懸膜蛋白(bai)沉淀(dian);
1.2 BCA方法測定蛋白濃度(貨(huo)號:RTP7102);
1.3 用膜蛋(dan)白重懸液(BN電(dian)泳用)調(diao)整蛋(dan)白濃(nong)度為1 μg/μl,按(an)需分裝,每管(guan)50 μl,-80℃保存待用;
1.4 取一管50 μl樣品,溶化混勻后4℃ 16000 g 5分鐘,去除上清(qing),保留沉淀;
1.5 沉(chen)淀中加入(ru)50 μl膜蛋白(bai)增溶(rong)液A(貨(huo)號:DM1080),輕柔重懸沉(chen)淀,盡量不產生氣泡,冰浴10分鐘;
1.6 4℃ 16000 g 15分鐘,取(qu)上清至一干凈1.5 ml離心管(guan)中即(ji)為增溶(rong)(rong)后(hou)膜(mo)蛋(dan)白溶(rong)(rong)液(小心不要吸(xi)取(qu)沉淀),此時得(de)到的膜(mo)蛋(dan)白濃度(du)為1 μg/μl,其中去垢(gou)劑DDM(n-Dodecyl β-D-maltoside,β-DM n-十二烷(wan)基-β-D-麥芽糖(tang)苷)終濃度(du)為1%;
1.7 膜(mo)(mo)蛋白溶液(ye)中加入(ru)1/10體積10×膜(mo)(mo)蛋白A型上(shang)樣緩沖液(ye)(配套膜(mo)(mo)蛋白增溶液(ye)A使用(yong))(貨號(hao):PL130),使用(yong)BN凝膠電(dian)泳(貨號(hao):RTD6139,RTD6140),每個泳道上(shang)樣5-20 μg。
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