Anti-GAPDH抗體（兔單(dan)抗）
Anti-GAPDH Antibody（Monoclonal Antibody from Rabbit）
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產品編號
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產品名稱
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規格
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RGA1150
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Anti-GAPDH抗(kang)體（兔單(dan)抗(kang)）
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20 μl
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● 產(chan)品簡介
甘油醛-3- 磷(lin)酸(suan)脫氫酶(mei)（
Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase，GAPDH） 是糖(tang)酵解(jie)（glycolysis）過程中的關鍵酶(mei)，分子量為37 kD左右(you)。它催化(hua)甘油醛-3-磷(lin)酸(suan)的氧化(hua)磷(lin)酸(suan)化(hua)反應。
GAPDH 作為管(guan)家基因在(zai)同種細胞(bao)或者(zhe)組織(zhi)中一般是恒定(ding)、高水平表達的，常用作Western Blot
實驗的內參照。
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來源
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用途及稀釋比例(li)
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抗體類型
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GAPDH分子量
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Rabbit
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WB 1:3000-5000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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單克隆抗體
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36-38 kD
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注：WB, Western blot; IHC, Immunohistochemistry;
IF, Immunofluorescence
本抗體如果(guo)用(yong)于(yu)常規的Western檢測，稀(xi)釋5000倍(bei)，一次使用(yong)5 ml稀(xi)釋的抗體，至少(shao)可以檢測20次。
● 貯存(cun)形式：
穩定溶(rong)液，1 mg/ml 抗體(ti)溶(rong)于(yu)PBS，50%甘油，pH7.2。
● 保存及(ji)運輸條件：
-20℃保(bao)存(cun)，一年有效；避免(mian)反復凍融；濕冰運輸。
● 使用說明：
1. Western Blot雜(za)交(ECL顯色)：1:3000-5000稀釋，常(chang)溫(wen)孵育(yu)1-2 h或4℃過夜(ye)。
2. 免(mian)疫熒光（IF）和(he)免(mian)疫組(zu)化(hua)（IHC）：1:200-1000稀釋。
● 實驗示(shi)例：
實驗程序(xu) Jurkat 無去垢劑提取TP，GAPDH檢(jian)測（pI~8.6）：
凝膠：RTD6139-0416 BN預(yu)制膠
電泳(yong)：1×藍色電泳(yong)緩沖液（含0.002% G-250）
穩(wen)壓(ya)150V 45分鐘(zhong)；1×無(wu)色電泳緩(huan)沖(chong)液(ye) 穩(wen)壓(ya)150V 46分鐘(zhong)
膠浸泡：1×BN轉膜緩沖液（含20%甲醇）+0.1%SDS浸泡10分鐘
轉(zhuan)膜：1×BN轉(zhuan)膜緩沖液（含20%甲醇），穩流200 mA
（電(dian)壓89-81V） 1.5小時，未(wei)冰浴
膜漂洗去藍色(se)(se)：PVDF膜無水甲醇浸泡(pao)10分鐘(zhong)至膜無色(se)(se)
封閉：無蛋白(bai)快速(su)封閉，RT，30分(fen)鐘
一抗：GAPDH抗體，1：5000 RT 一小時
二抗：羊抗兔IgG-HRP 1：5000 RT 1.5小時
ECL：ECL發光(guang)，機(ji)器拍照(zhao)，曝(pu)光(guang)2min