Anti-COX
IV抗體(ti)(鼠單抗)
Anti-COX IV Antibody(Monoclonal Antibody from Mouse)
產品編號
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產品名(ming)稱(cheng)
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規格(ge)
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RGC2030
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Anti-COX IV抗體(鼠單抗)
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20 μl
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● 產品簡介
來(lai)源
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用(yong)途(tu)及稀釋比例
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抗體類(lei)型
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COX IV分子量
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Mouse
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WB 1:5000-10000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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單克隆抗體
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~17 kD
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注:WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF,
Immunofluorescence
COX IV抗體用經過適當修飾的人工合成COX IV一(yi)段多(duo)肽作為抗原制(zhi)備(bei)而成的抗COX IV小鼠單克隆抗體。本(ben)抗體在Western blot或(huo)免疫染色(se)時僅識別(bie)COX IV。COX IV抗體可(ke)用作線(xian)粒體蛋白(bai)上樣量的內參。
真核細(xi)胞(bao)中的(de)(de)細(xi)胞(bao)色素(su)C氧(yang)(yang)(yang)化(hua)(hua)酶(Cytochrome C Oxidase,簡稱COX)是一種異(yi)源(yuan)寡聚(ju)酶,通常含有13個(ge)(ge)亞基(ji),定位于線(xian)粒體內膜(mo),是線(xian)粒體呼(hu)吸鏈的(de)(de)酶復合(he)物,它可以從每4個(ge)(ge)還原性的(de)(de)細(xi)胞(bao)色素(su)C得到(dao)一個(ge)(ge)電子(zi)(zi)(zi),傳遞給一個(ge)(ge)氧(yang)(yang)(yang)分(fen)(fen)子(zi)(zi)(zi),最終(zhong)把一個(ge)(ge)氧(yang)(yang)(yang)分(fen)(fen)子(zi)(zi)(zi)轉變成(cheng)(cheng)(cheng)兩個(ge)(ge)水(shui)分(fen)(fen)子(zi)(zi)(zi)。在此過程中細(xi)胞(bao)色素(su)C氧(yang)(yang)(yang)化(hua)(hua)酶會(hui)結合(he)4個(ge)(ge)質(zhi)子(zi)(zi)(zi)用于產生2個(ge)(ge)水(shui)分(fen)(fen)子(zi)(zi)(zi),同時把4個(ge)(ge)質(zhi)子(zi)(zi)(zi)轉移到(dao)膜(mo)的(de)(de)另外(wai)一側產生質(zhi)子(zi)(zi)(zi)梯度,即建立跨膜(mo)的(de)(de)電化(hua)(hua)學勢,隨后ATP合(he)成(cheng)(cheng)(cheng)酶可以利于該電化(hua)(hua)學勢合(he)成(cheng)(cheng)(cheng)ATP。細(xi)胞(bao)色素(su)C氧(yang)(yang)(yang)化(hua)(hua)酶中構成(cheng)(cheng)(cheng)催化(hua)(hua)中心(xin)的(de)(de)3個(ge)(ge)最大的(de)(de)亞基(ji)由線(xian)粒體DNA編(bian)碼(ma),其余10個(ge)(ge)亞基(ji)包括COX IV由細(xi)胞(bao)核內的(de)(de)基(ji)因組DNA編(bian)碼(ma)。細(xi)胞(bao)色素(su)C氧(yang)(yang)(yang)化(hua)(hua)酶活性缺(que)陷和(he)人類多種疾病相關。
本抗(kang)體如(ru)果用(yong)于(yu)常規的Western檢(jian)(jian)測,至少可以(yi)檢(jian)(jian)測20次。
● 貯存形式:
1 mg/ml抗體溶于PBS,50%甘油,pH7.2。
● 保存及運輸條件:
-20℃保存,一年有效;避(bi)免反復凍融;濕(shi)冰運(yun)輸。
● 使用說明:
1. Western Blot雜交(ECL顯色(se)):1:1000-5000稀釋,常溫(wen)孵育(yu)1-2 h或4℃過夜(ye)。
2. 免(mian)疫熒光(IF)和免(mian)疫組化(IHC):1:200-1000稀釋。
● 實驗示例:
K562懸浮細胞膜蛋白(bai)檢(jian)測
樣品:TP為RIPA提取總蛋白做對照;CY為膜蛋白提取上清-胞漿蛋白;M為使用不同去垢(gou)劑(ji)提取的膜蛋(dan)白
電泳:4-18% RealPAGE PrecastGel,樣品使用5×速溶性上樣緩(huan)沖液(ye)配成(cheng)0.5μg/μl,37度30min后上樣,上樣體積為10μl和20μl,
轉膜:0.45μm PVDF膜(mo),1×RealBlot濕轉 400mA 35min。
封(feng)閉:快速(su)封(feng)閉液 RT 10 min
一(yi)抗:ATPase兔單抗 1:5000 O/N;
GAPDH兔多抗 1:3000 O/N;
COX
IV鼠單抗 1:5000
O/N。
二抗(kang):羊抗(kang)鼠IgG-HRP(貨號(hao):HGM1060) 1:5000 RT
60min;羊抗兔(tu)IgG-HRP(貨號:HGM1020) 1:5000 RT 60min;
檢(jian)測:RealECL發光(guang)液(ye)(貨號:EC2520)自動曝(pu)光1秒
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