PCR反應試劑盒 ( 2000bp )
貨(huo)號：RTC3105
● 簡介：
本(ben)試(shi)劑盒包含完成(cheng)PCR反(fan)應所需全部試(shi)劑，可進(jin)行PCR實驗的(de)教學和(he)科研。其中模板為質(zhi)粒DNA；引(yin)物(wu)為根據質(zhi)粒DNA序(xu)列設計的(de)上、下游引(yin)物(wu)；2×Taq
PCR MasterMix包含Taq DNA聚合(he)酶、dNTPs、MgCl2、反應(ying)緩沖液、PCR反應(ying)的(de)增強劑(ji)和優化劑(ji)以及(ji)穩(wen)定劑(ji)。使用時(shi)，只需補加實驗所需的(de)引物(wu)和模板后(hou)即可進行PCR反應(ying)，可最大(da)(da)限度的(de)減少人為誤差，具有快速簡便(bian)、穩(wen)定性好等優點。使用本試劑(ji)盒進行PCR反應(ying)后(hou)，PCR產物(wu)大(da)(da)小應(ying)為2000bp。
● 貯存：-20℃。有效期一年(nian)。
● 包裝：20次
● 試劑盒組成(cheng)：
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組成
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濃度
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體積(ji)
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模板
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10
ng/μl
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30
μl
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上游引物（2000
FW）
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10
μM
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30
μl
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下(xia)游引物（2000
RV）
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10
μM
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30
μl
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2×Taq
PCR MasterMix(含染料)
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-
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2×500
μl
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去離子(zi)水
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-
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1
ml
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● 實驗步驟：
1.
冰浴中徹底融化模板，引物(wu)和(he)2×Taq
PCR MasterMix，混(hun)勻(yun)后快(kuai)甩(shuai)離心將溶液收集到管底。
2.
按照下(xia)表(biao)在(zai)0.2ml
PCR管中(zhong)制備反應體系：
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50μl反應體系
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上(shang)游(you)引(yin)物（2000FW） 10μM
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1 μl
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下游引物(wu)（2000RV） 10μM
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1 μl
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模板
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1 μl
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2×Taq
PCR MasterMix
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25 μl
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水
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22 μl
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3.
快(kuai)甩離心將反應(ying)液收集到(dao)管(guan)底。
4.
PCR儀如果沒有熱蓋加熱的話，補加25μl礦物油(you)。
5.
PCR儀上(shang)執行以下程序：
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步驟
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溫度
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時間
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循環數
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初始變性
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94℃
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5 min
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1
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變性
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94℃
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30 sec
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30
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退火
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54℃
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30 sec
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延伸
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72℃
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2 min
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最后(hou)延伸(shen)
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72℃
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5 min
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1
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6. 反應完成后，取(qu)5ml反應液(ye)，1％瓊脂糖凝膠電泳(yong)，觀察條(tiao)帶(dai)情(qing)況。