PCR染料添加劑（10×）
● 儲存和運輸:-20℃保存；常溫運(yun)輸(shu)
● 貨號：RTC3106
● 產品(pin)包裝：
5×1.5 ml
● 產品簡(jian)介
PCR染料添加(jia)劑為含(han)有(you)紅色(se)染料和助沉劑的混合物，按照10倍體積稀釋(shi)于PCR反應體系中，PCR結(jie)束后(hou)可以直接上樣(yang)電泳，不用(yong)再與loading buffer混合，方(fang)便快(kuai)捷。特有的紅色(se)染料不會影響Taq酶活性，電(dian)泳時指示前沿為紅色(se)。
● 反應(ying)舉例：
注意：以(yi)下舉例為常規PCR反(fan)應系(xi)統，僅(jin)供參考。實(shi)際反(fan)應條(tiao)件因模板、引(yin)物(wu)等的結構不同而(er)各異，需根據(ju)模板、目的片段的大(da)小(xiao)、堿基(ji)序(xu)列和引(yin)物(wu)長短等具體情況(kuang)，設(she)定最佳反(fan)應條(tiao)件。
以人基因(yin)組DNA為模板(ban)，擴增1 kb的片段
1. 反應(ying)體系(xi)的建立：50μl反應(ying)體系(xi)如下(可根(gen)據比例放(fang)大或縮(suo)小反應(ying)體系(xi))：
|
Template
|
<1mg
|
|
Primer 1（10 mM）
|
1 ml
|
|
Primer 2（10 mM）
|
1 ml
|
|
10×Taq Buffer
|
5 ml
|
|
dNTP
Mixture(10 mM)
|
1 ml
|
|
Taq (5 U/ml)
PCR染料添加劑（10×）
|
0.5 ml
5
μl
水(shui)至50μl
|
2.
PCR反(fan)應循環的(de)設(she)置：
94℃ 3 min
94℃ 30 sec
55℃30 sec 30
cycles
72℃ 1 min
72℃5 min
3.
結果(guo)檢測：反應(ying)結束后取5μl反應(ying)產物，瓊脂糖凝膠電泳檢測。
注：紅色(se)指示染料電泳中(zhong)的遷移速度略快于(yu)溴酚(fen)藍(lan)。
