寬分子量非變性電泳蛋白質Marker
II(21-880 kD)
Broad MW Native
Electrophoresis Protein Marker II(21-880 kD)
名稱
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貨號
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規格
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寬分子量非變性電泳蛋白質Marker II(21-880
kD)
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RTD6136
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20次(ci)(100
μl)
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●儲存、運輸及效期:
-20℃保存,濕冰運輸,有效期為12個月。
● 產品簡介:
本產品有5種蛋白組成,分子量范圍為21-880
kD,經過非變性電泳后,用考馬斯亮藍染色后可以得到6條主帶。
蛋白(bai)名稱
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分子量(kD)
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蛋白(bai)來源
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pI
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說明(ming)
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Ferritin
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440
880
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equine
spleen
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N/A
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非變性下440kD和880
kD
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RC2
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200
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重(zhong)組蛋(dan)白(bai)
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6.7
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單體蛋白分子量為75
kD,在Tris-甘氨酸(suan)非變(bian)性下表(biao)現為分子量~200
kD
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RC1
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75
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重組(zu)蛋(dan)白
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5.9
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單(dan)體(ti)蛋白分子(zi)量為75 kD,在Tris-甘(gan)氨酸非變性下表現(xian)為分子量~75 kD,同時(shi)會(hui)形成少量二聚體(dimer)
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Ovalbumin
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45
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egg
white
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5.2
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球(qiu)蛋白,分子量為45kD,非變性條件下大于45 kD會(hui)出現電(dian)荷異構體(charge
isomer)
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Trypsin
Inhibitor
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21
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Soybean
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4.5
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非變性下21 kD
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● 使用說明:
1. 取(qu)出產品(pin)后,常溫融化后,徹(che)底混勻,上樣電泳(yong)。
注:上樣量根據膠的厚度和梳子的寬度確定。一般說來,1.0厚度10齒梳子加樣孔上樣5 μl,1.0厚度15齒梳子加樣孔上樣量2.5 μl,其他規格梳子請適當調整上樣量。
2. 該產品不(bu)含蛋白(bai)凝膠(jiao)制備試劑,您可以選擇非(fei)變性PAGE凝膠(jiao)制備及電泳試劑盒(貨號:
RTD6130或(huo)(huo)RTD6135)。如(ru)自備試劑,經典Laemmli系統中把制膠溶液、電(dian)泳(yong)緩沖液和上樣緩沖液中的SDS和還原劑(DTT或(huo)(huo)β-巰基(ji)乙醇)全部去除即可進(jin)行非變性電(dian)泳(yong)。
3. 電泳條件:
建議使用10%非變性膠或者4-15%梯度非變性膠(貨號:RTD6117-0415)進行電泳。
恒電壓
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120 V
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起始電流
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27-35 mA/板膠
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結束電流
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7-10 mA/板膠
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電泳(yong)時間
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1h20min+
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4. 電泳結(jie)束(shu)后,考馬(ma)斯(si)亮(liang)藍染色,觀察結(jie)果。
注:使用銀染染色時,由于靈敏度高于考馬斯亮藍染色方法,需要適當降低Marker上樣量,一般稀釋50倍后上樣。
注意:
1. 本蛋白Marker不適用于變性蛋白電泳(SDS-PAGE),因為在SDS存在下(xia),含有(you)多(duo)個亞單位(wei)的蛋白會不同程(cheng)度解聚。
2. 在非變性條件下,蛋白的遷移與蛋白的電荷、蛋白形狀以及蛋白分子量都有關,因此不能精確判斷待測蛋白的分子量,只能粗略判斷蛋白的大小。
● 實驗示例:
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4-15% Tris-Glycine
Native Gel
電泳條件:1×TG 200V 50-19mA 47 min
染色:FastBlue蛋白染色液,20min
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