考馬斯亮藍染色液(常規法)
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產品(pin)編號
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規格
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貯存
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RTD6203
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250ml
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常溫
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● 儲存條件
常溫保存，開(kai)封(feng)后一年有效。
● 產品簡介
考(kao)馬斯(si)亮藍(lan)(lan)染(ran)(ran)(ran)色(se)液(Commassie Blue Staining Solution)是以考(kao)馬斯(si)亮藍(lan)(lan)G-250為主要成分，采(cai)用(yong)新配方(fang)配置而成。可(ke)(ke)用(yong)于SDS-PAGE或非變(bian)性(xing)PAGE膠（native
gel）的染(ran)(ran)(ran)色(se)。采(cai)用(yong)常(chang)規染(ran)(ran)(ran)色(se)方(fang)法(fa)需至少1小時(shi)可(ke)(ke)以完成染(ran)(ran)(ran)色(se)；采(cai)用(yong)快速染(ran)(ran)(ran)色(se)方(fang)法(fa)數(shu)分鐘即(ji)可(ke)(ke)完成染(ran)(ran)(ran)色(se)。本染(ran)(ran)(ran)色(se)液經過改(gai)良，不含有(you)毒的甲醇，但含有(you)刺激性(xing)氣(qi)味的乙(yi)酸。
● 使用說明：
一. 常規染色脫色方法：
1.
電泳結束(shu)后(hou)，取凝膠放入適量考(kao)馬(ma)斯亮(liang)藍染(ran)色(se)液中，確(que)保(bao)染(ran)色(se)液可以(yi)充分覆蓋凝膠。
2.
置(zhi)于水平(ping)搖(yao)床或側擺搖(yao)床上(shang)緩慢搖(yao)動，室溫染(ran)色1小時或更長(chang)時間。
注(zhu)：具體的(de)染(ran)色(se)(se)(se)(se)(se)時(shi)(shi)間(jian)取決(jue)于(yu)凝膠(jiao)的(de)厚度(du)和染(ran)色(se)(se)(se)(se)(se)時(shi)(shi)的(de)溫(wen)度(du)。凝膠(jiao)較(jiao)厚，溫(wen)度(du)較(jiao)低，則(ze)染(ran)色(se)(se)(se)(se)(se)時(shi)(shi)間(jian)宜適當延(yan)長。凝膠(jiao)較(jiao)薄(bo)，溫(wen)度(du)較(jiao)高，則(ze)染(ran)色(se)(se)(se)(se)(se)時(shi)(shi)間(jian)可以適當縮短(duan)。通(tong)常染(ran)色(se)(se)(se)(se)(se)至凝膠(jiao)的(de)顏色(se)(se)(se)(se)(se)和染(ran)色(se)(se)(se)(se)(se)液(ye)的(de)顏色(se)(se)(se)(se)(se)非(fei)常接近，在染(ran)色(se)(se)(se)(se)(se)液(ye)中幾(ji)乎看不(bu)清凝膠(jiao)時(shi)(shi)，可以認為已染(ran)色(se)(se)(se)(se)(se)充分。染(ran)色(se)(se)(se)(se)(se)2-4個小時(shi)(shi)或更長時(shi)(shi)間(jian)不(bu)會對(dui)最終的(de)染(ran)色(se)(se)(se)(se)(se)效果產生(sheng)負面影(ying)響。
3.
倒出染色液(ye)。染色液(ye)可以回收(shou)重復使用(yong)至(zhi)少2-3次(ci)。
4.
加入適量(liang)脫(tuo)色(se)液，確保脫(tuo)色(se)液可以充(chong)分覆蓋凝膠。
注：脫(tuo)色(se)液(ye)可以(yi)使用考馬斯亮藍脫(tuo)色(se)液(ye)(RTD6204)；如(ru)果希望自行配制，推薦的脫(tuo)色(se)液(ye)配方為(wei)：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾(liu)水。
5.
置(zhi)于水平搖(yao)床或側擺搖(yao)床上緩(huan)慢搖(yao)動，室(shi)溫脫(tuo)色4-24小時(shi)。期間更換脫(tuo)色液2-4次，直至(zhi)藍色背景基本上全部被脫(tuo)去，并且(qie)蛋(dan)白(bai)條帶染(ran)色效果(guo)達到預期。通常蛋(dan)白(bai)條帶在脫(tuo)色1-2小時(shi)后即可出(chu)現(xian)。
注(zhu)：脫色期間(jian)可(ke)以在脫色液中加入一片吸水(shui)紙，可(ke)以使(shi)部分染料吸附(fu)在吸水(shui)紙上，加快脫色。脫色時間(jian)過長也會導致蛋白條(tiao)帶的顏色變(bian)淺。
6． 完成(cheng)脫色后(hou)，可(ke)以把(ba)凝膠(jiao)保存(cun)在水(shui)(shui)中，用于后(hou)續的(de)(de)拍照(zhao)等。保存(cun)在水(shui)(shui)中的(de)(de)凝膠(jiao)會發生(sheng)溶漲。如需避免溶漲，可(ke)以把(ba)膠(jiao)保存(cun)在含20%甘油的(de)(de)水(shui)(shui)中。長期保存(cun)可(ke)以制(zhi)備干膠(jiao)。
二. 快速染色脫色方法：
1.
電泳結束后，取膠(jiao)(jiao)放入適(shi)量考(kao)馬斯亮藍染色液中，微波爐加熱(re)至(zhi)接近沸騰或(huo)剛剛沸騰，立即停止加熱(re)。通常對于(yu)(yu)(yu)膠(jiao)(jiao)濃度大(da)于(yu)(yu)(yu)10％的(de)膠(jiao)(jiao)比較堅(jian)韌，在發生煮沸時不(bu)易破損；對于(yu)(yu)(yu)膠(jiao)(jiao)濃度小(xiao)于(yu)(yu)(yu)10%的(de)膠(jiao)(jiao)，宜盡(jin)量避免煮沸，以免出現膠(jiao)(jiao)碎裂的(de)情況。
2.
隨(sui)后在染(ran)色(se)液溫(wen)(wen)度較高的情(qing)況(kuang)下(xia)，在室溫(wen)(wen)搖(yao)(yao)床上搖(yao)(yao)動(dong)5-10分(fen)鐘。
3.
倒出(chu)染(ran)色(se)液(ye)。染(ran)色(se)液(ye)可以回收(shou)重復使用至(zhi)少2-3次。
4.
加入適量脫色(se)液，確保染色(se)液可(ke)以(yi)充分覆蓋凝膠。
注：脫(tuo)(tuo)色(se)液(ye)可以(yi)使用考馬斯亮藍染(ran)色(se)脫(tuo)(tuo)色(se)液(ye)(RTD6204)；如(ru)果希望自(zi)行配制，推薦的脫(tuo)(tuo)色(se)液(ye)配方為(wei)：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水。
5.
微波(bo)爐(lu)加(jia)熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加(jia)熱。
6.
隨后在(zai)脫色液溫(wen)度較高的情(qing)況(kuang)下，在(zai)搖(yao)床上搖(yao)動(dong)5-10分鐘。此時通常可以觀察到比較清楚的蛋白條帶。
7.
更換新鮮的脫色(se)液，重復(fu)步驟5和步驟6，直(zhi)至藍色(se)背景基本上全部被脫去，蛋白條帶染色(se)效果達到(dao)預期。
8.
完成脫色(se)后，可(ke)以把(ba)凝膠保存(cun)在水(shui)中，用于后續的拍照(zhao)等。保存(cun)在水(shui)中的凝膠會(hui)發生溶漲(zhang)(zhang)。如需避免溶漲(zhang)(zhang)，可(ke)以把(ba)膠保存(cun)在含(han)20%甘油的水(shui)中。長期(qi)保存(cun)可(ke)以制備干膠。