考馬斯亮藍脫色液(常規法)
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產品編號
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規(gui)格
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貯存
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RTD6204
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500ml
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常溫
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● 儲存條件
常溫保存，開(kai)封后一年有效。
● 產品簡介
考馬(ma)斯亮(liang)(liang)(liang)藍(lan)脫(tuo)色(se)(se)液(ye)(Commassie
Blue Staining Destaining Solution)是用(yong)(yong)于蛋白凝(ning)膠考馬(ma)斯亮(liang)(liang)(liang)藍(lan)染色(se)(se)后凝(ning)膠的脫(tuo)色(se)(se)。本脫(tuo)色(se)(se)液(ye)可以和考馬(ma)斯亮(liang)(liang)(liang)藍(lan)染色(se)(se)液(ye)(RTD6203)配套使用(yong)(yong)。使用(yong)(yong)本脫(tuo)色(se)(se)液(ye)進行(xing)脫(tuo)色(se)(se)，采用(yong)(yong)常規脫(tuo)色(se)(se)方法至少(shao)脫(tuo)色(se)(se)1小時可以觀(guan)察(cha)到(dao)蛋白條(tiao)帶；采用(yong)(yong)快(kuai)速脫(tuo)色(se)(se)方法不足20分鐘(zhong)即可觀(guan)察(cha)到(dao)蛋白條(tiao)帶。觀(guan)察(cha)到(dao)最清晰的蛋白條(tiao)帶則需脫(tuo)色(se)(se)更長時間(jian)。
本脫色液經過改良(liang)，不含有(you)毒的甲醇，但含有(you)刺激性(xing)氣(qi)味的乙酸。
● 使用說明：
一. 常規染色脫色方法：
1.
電泳結束后，取凝膠放入適量(liang)考馬斯亮藍染色(se)液中(zhong)，確(que)保染色(se)液可(ke)以充分覆蓋凝膠。
2.
置于水平搖床或側擺搖床上(shang)緩慢搖動，室溫(wen)染色1小時或更長(chang)時間。
注：具體(ti)的(de)染(ran)(ran)色時間(jian)取決(jue)于凝(ning)膠(jiao)的(de)厚(hou)度和染(ran)(ran)色時的(de)溫度。凝(ning)膠(jiao)較(jiao)厚(hou)，溫度較(jiao)低，則染(ran)(ran)色時間(jian)宜適當(dang)延長。凝(ning)膠(jiao)較(jiao)薄(bo)，溫度較(jiao)高(gao)，則染(ran)(ran)色時間(jian)可(ke)以(yi)適當(dang)縮短。通常染(ran)(ran)色至凝(ning)膠(jiao)的(de)顏(yan)色和染(ran)(ran)色液(ye)的(de)顏(yan)色非(fei)常接近，在(zai)染(ran)(ran)色液(ye)中幾乎看不清(qing)凝(ning)膠(jiao)時，可(ke)以(yi)認(ren)為已染(ran)(ran)色充分。染(ran)(ran)色2-4個小時或(huo)更長時間(jian)不會(hui)對最(zui)終的(de)染(ran)(ran)色效果產(chan)生(sheng)負面影響(xiang)。
3.
倒(dao)出(chu)染(ran)色(se)液(ye)。染(ran)色(se)液(ye)可以(yi)回(hui)收(shou)重(zhong)復(fu)使用(yong)至少(shao)2-3次。
4.
加入(ru)適量脫色液(ye)，確保脫色液(ye)可以充分(fen)覆(fu)蓋凝(ning)膠。
注：脫(tuo)(tuo)色(se)液可以(yi)使用考(kao)馬(ma)斯亮(liang)藍脫(tuo)(tuo)色(se)液(RTD6204)；如果希望自(zi)行配制(zhi)，推薦的脫(tuo)(tuo)色(se)液配方(fang)為：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水(shui)。
5.
置于水(shui)平搖(yao)床(chuang)或(huo)側(ce)擺搖(yao)床(chuang)上(shang)緩(huan)慢搖(yao)動，室溫脫色(se)4-24小時(shi)(shi)。期(qi)間更(geng)換脫色(se)液2-4次，直至藍色(se)背景基本上(shang)全部被脫去，并且蛋(dan)白條(tiao)帶(dai)染(ran)色(se)效果達(da)到預期(qi)。通(tong)常蛋(dan)白條(tiao)帶(dai)在脫色(se)1-2小時(shi)(shi)后即可出現。
注：脫色(se)(se)(se)期間可(ke)(ke)以在脫色(se)(se)(se)液中加入一片(pian)吸水紙，可(ke)(ke)以使部分染料吸附(fu)在吸水紙上，加快脫色(se)(se)(se)。脫色(se)(se)(se)時(shi)間過(guo)長也(ye)會(hui)導致蛋白條帶(dai)的(de)顏色(se)(se)(se)變淺。
6． 完成脫色后，可(ke)(ke)以把(ba)凝膠(jiao)保(bao)存(cun)在水中，用于后續(xu)的(de)拍照等。保(bao)存(cun)在水中的(de)凝膠(jiao)會發生溶漲。如需(xu)避免溶漲，可(ke)(ke)以把(ba)膠(jiao)保(bao)存(cun)在含20%甘油的(de)水中。長期保(bao)存(cun)可(ke)(ke)以制備干膠(jiao)。
二. 快速染色脫色方法：
1.
電泳結束后(hou)，取膠(jiao)放入(ru)適量考馬(ma)斯亮(liang)藍(lan)染色液(ye)中(zhong)，微波爐加(jia)熱至接(jie)近沸(fei)騰或剛剛沸(fei)騰，立(li)即停(ting)止加(jia)熱。通常對于膠(jiao)濃度大(da)于10％的膠(jiao)比較堅韌，在發生煮(zhu)沸(fei)時不易破損；對于膠(jiao)濃度小于10%的膠(jiao)，宜(yi)盡(jin)量避免(mian)煮(zhu)沸(fei)，以(yi)免(mian)出現膠(jiao)碎裂的情況(kuang)。
2.
隨(sui)后在染(ran)色液(ye)溫度較(jiao)高(gao)的情況(kuang)下，在室溫搖床上搖動5-10分(fen)鐘。
3.
倒出染(ran)色液(ye)。染(ran)色液(ye)可以回收重復使(shi)用至少2-3次。
4.
加入適(shi)量脫(tuo)色液，確保(bao)染(ran)色液可(ke)以充(chong)分覆蓋凝膠。
注：脫(tuo)(tuo)色液(ye)可(ke)以使(shi)用(yong)考馬斯(si)亮藍染色脫(tuo)(tuo)色液(ye)(RTD6204)；如果希望自行(xing)配(pei)制，推薦的脫(tuo)(tuo)色液(ye)配(pei)方為(wei)：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水(shui)。
5.
微波(bo)爐(lu)加熱至接(jie)近沸騰(teng)或剛剛沸騰(teng)，立即(ji)停(ting)止(zhi)加熱。
6.
隨(sui)后在(zai)脫色液溫度較(jiao)高的情況下，在(zai)搖床上搖動5-10分鐘。此時通常可(ke)以觀察到比較(jiao)清(qing)楚的蛋(dan)白條帶。
7.
更換(huan)新(xin)鮮(xian)的(de)脫色液(ye)，重復步驟5和步驟6，直至藍色背景基本(ben)上全部(bu)被脫去，蛋白條帶染色效(xiao)果達到(dao)預期。
8.
完成(cheng)脫色后(hou)，可(ke)以(yi)把凝膠(jiao)(jiao)保存在水(shui)中(zhong)(zhong)，用于后(hou)續的(de)(de)(de)拍照等。保存在水(shui)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)凝膠(jiao)(jiao)會(hui)發(fa)生溶漲。如需避免溶漲，可(ke)以(yi)把膠(jiao)(jiao)保存在含20%甘油的(de)(de)(de)水(shui)中(zhong)(zhong)。長期保存可(ke)以(yi)制(zhi)備干(gan)膠(jiao)(jiao)。