單鏈DNA PAGE電泳染色試劑盒
產品編(bian)號
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規格
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運輸
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RTS5103
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20次(ci)
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常溫
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● 產品簡介
單鏈DNA PAGE電泳染色試劑盒(ssDNA PAGE Stain Kit for Nucleic Acids)是一種快速簡單、可用于尿素-聚丙烯酰胺凝膠中的核酸檢測的試劑盒。采用新型染色劑,電泳結束后可以直接染色凝膠,不用借助任何成像儀器,既能觀察核酸條帶。該方法能檢測到下限10ng的 ssDNA條(tiao)帶,常用于(yu)檢(jian)測 SSR 標記、SNP 標記等。
按(an)照每次使用50 ml染色液(ye)計算,本試劑盒可用于18-20塊常規的8×10cm凝膠(jiao)的染色。
● 產品組成:
產品(pin)編(bian)號
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產品名稱(cheng)
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規格
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貯存(cun)
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RTS5103-1
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染色(se)貯存液(10×)
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100 ml
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常(chang)溫
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RTS5103-2
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染(ran)色緩(huan)沖液(ye)(5×)
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250 ml
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常溫
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-
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125ml棕色塑料瓶(空)
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-
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● 儲存條件
常溫(wen)保存;常溫(wen)運(yun)輸(shu),開封(feng)后一年有效。
● 使用方法:
一. 即用型染色液配制:
在125 ml棕色(se)塑料瓶中依(yi)次加入以(yi)下組份(fen),混勻(yun);即用型染色(se)液常溫貯存(cun)。
順序
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組份
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50 ml
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1
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染(ran)色(se)貯存(cun)液(10×)
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5
ml
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2
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超純水
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35
ml
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3
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染色緩(huan)沖(chong)液(5×)
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10
ml
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二. 染色步驟:
1. ssDNA PAGE電泳(yong)后,凝膠用蒸餾(liu)水漂洗1-2次。
2. 加入適(shi)量(liang)即用型染色液覆(fu)蓋凝膠,一(yi)(yi)般8×10cm凝膠50 ml即可(ke),在搖床上常溫(wen)搖動15-20分鐘,搖動速度為(wei)60-70rpm。一(yi)(yi)般2-5分鐘可(ke)以看到條帶。
三. 脫色步驟:
倒掉染色液,加入適量蒸餾水,在搖床上常溫搖動15-20分鐘,期間可以更換2-3次蒸餾水;至凝膠背景透明后記錄圖片。
注:1. 染(ran)色(se)時(shi)(shi)間不(bu)要太長,更不(bu)能(neng)過夜(ye)染(ran)色(se)。長時(shi)(shi)間染(ran)色(se)會導(dao)致ssDNA游離(li)出凝膠(jiao),導(dao)致膠(jiao)上無帶。
2. 使(shi)用后的染色液收集后,可以重復使(shi)用2-3次
● 實驗示例:
● 常見問題:
1.
背景太深:
a. 顯色時間過長。通常凝膠在染色液里2-5分鐘既能看到條帶,顯色反應會在20分鐘內結束,顯色反應時間過長會藍色背景很深。
2. 核酸條帶非常淺:
a. 上樣量太少。 該染色方法可以檢測到10
ng 單鏈DNA片段,請控制核酸上樣量。
3. 染(ran)(ran)色(se)方(fang)法(fa)適合于(yu)雙鏈DNA染(ran)(ran)色(se)嗎?
不適合。雙鏈DNA的分離一般用非變性DNA PAGE電泳,該染色(se)液(ye)不能有效染色(se)。