GUS陽性對照檢測說明
陽性對(dui)照水稻種子:ZM30(含GUS基因(yin))
陰(yin)性對照水(shui)稻(dao)種(zhong)子(zi):ZH8(野(ye)生(sheng)型,無GUS基因)
檢測程序:
1. 溶(rong)液(ye)配制:
取2支1.5
ml 離心(xin)管,編號(hao)GUS和(he)CK(對照組(zu))。順序(xu)加入1 ml GUS染(ran)色(se)緩沖(chong)液(ye)(ye)和(he)20 μl X-gluc溶(rong)液(ye)(ye)(注意X-gluc溶(rong)液(ye)(ye)顏色(se),正常顏色(se)為(wei)無(wu)色(se),如果溶(rong)液(ye)(ye)變紅,說明(ming)溶(rong)液(ye)(ye)失效),混勻。
2. 種子(zi)處(chu)理(li):
去除水稻種(zhong)子(zi)(zi)種(zhong)殼,用刀片沿種(zhong)子(zi)(zi)短(duan)軸將種(zhong)子(zi)(zi)切成兩半。離心管(guan)中分(fen)別放入4-6粒切開的種(zhong)子(zi)(zi)。
3.
常溫25℃過夜放置。
4.
預期結(jie)果(如下圖(tu)):
ZM30 種子出現藍色。
ZH8
種(zhong)子不出現藍色(se)。