類囊體膜增溶緩沖液
類囊體膜增溶緩沖液(ye)配制(zhi):
將2.5 ml增溶緩沖液(2×)全部加入到增溶劑粉末中,加入滅菌水定容至5 ml,徹底混勻,即配成5 ml增溶緩沖液,適量分裝,-20℃貯存,盡量避免反復凍融。
1.9.1 取50 μl(濃度為1 mg Chl/ml)類囊體膜樣(yang)品, 4℃ 16000 g離(li)心5分(fen)鐘,棄上清。
1.9.2 沉淀中加入50 μl類囊體膜增溶緩沖液重懸樣品(此時樣品濃度為1 mg Chl/ml),輕柔混勻,避免產生大量氣泡,冰浴10 min; 4℃ 16000 g離心15 min;上清為綠色,有微量沉淀。 注:如上清為無色,說明增溶不(bu)好。
1.9.3 取(qu)上清(qing)移至新(xin)管中(大約可(ke)以取(qu)到45 μl上清(qing)),加入1/10體積的類(lei)囊體膜(mo)上樣緩沖液,BN-PAGE 3-12%或4-16%梯度膠電泳(貨號:RTD6139-0312或RTD6139-0416),上樣體積5-15 μl。