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SYBR Green核(he)酸染料(10000× in DMSO，電泳級)
● 產品規(gui)格(ge)：
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產(chan)品編號
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產品(pin)名(ming)稱
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包裝(zhuang)
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SY001
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SYBR
Green核酸染(ran)料(liao) （10000× in DMSO，電泳級）
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50
μl
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說明(ming)書
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一(yi)份(fen)
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● 簡介：
SYBR Green是高(gao)靈(ling)敏的DNA熒光染料，適用于各種(zhong)電(dian)泳分析，操(cao)作簡單，至少可檢出(chu)20 pg DNA，高于EB染色法25-100倍。SYBR Green 與dsDNA 結合熒光信號(hao)會(hui)增強800-1000倍(bei)，用SYBR Green染色(se)的(de)凝膠樣品熒光信號(hao)強，背(bei)景信號(hao)低，可適用于多種電(dian)泳分(fen)析。
SYBR Green適合(he)于多種凝(ning)膠電(dian)(dian)泳方法：瓊脂糖凝(ning)膠，聚丙(bing)烯酰胺(an)凝(ning)膠電(dian)(dian)泳，脈沖電(dian)(dian)場凝(ning)膠電(dian)(dian)泳以及毛細管(guan)電(dian)(dian)泳等。SYBR Green與(yu)雙(shuang)鏈DNA的親和(he)力(li)非常高，因此可(ke)以用(yong)做(zuo)電泳前染色，對分子生物學中常用(yong)的酶（如：Taq 酶、逆轉錄酶、內切酶、T4連接酶等(deng)）沒有抑制作用(yong)。另外，SYBR Green與EB相比，誘變能力大(da)大(da)降低。
● 貯(zhu)存(cun)：4℃，避光(guang)保存。
● SYBR
Green使用(yong)方(fang)法：
注意：染料使(shi)(shi)用前(qian)應在室溫下(xia)徹底融化混(hun)勻后使(shi)(shi)用。
SYBR Green后(hou)染(ran)方(fang)法（推(tui)薦方法）
1. 制作(zuo)不(bu)含染料(liao)的凝膠，按照常規方法進行電泳。
2. 用pH 7.0 - 8.5 的緩沖液(ye)（如(ru)：TAE，TBE 或 TE），按照10000：1的比例稀釋SYBR Green濃縮液（如50ml 1×TAE中加入5μl 染料(liao)），混勻，制(zhi)成染色溶液。
3. 將染(ran)色溶液倒入(ru)合適的聚丙烯容(rong)器中，放入(ru)凝(ning)膠(jiao)，用鋁箔蓋住容(rong)器使染(ran)料避(bi)光。室溫振蕩(dang)染(ran)色10-30分鐘，染色(se)時間因凝膠濃度和厚度而(er)定(ding)。聚(ju)丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色(se)，將配好的(de)工作溶液(ye)輕輕地倒在膠板(ban)上，讓工作液(ye)均勻(yun)地覆蓋整個膠板(ban)，并染色(se)30分鐘。玻璃平皿必須預先經(jing)過硅烷(wan)化溶液處(chu)理（避免染料吸附在玻璃表面上）。
4. 紫外燈下(xia)觀測(ce)。
SYBR Green預(yu)染方法(fa)
1. 制膠(jiao)：按常規方法制備凝(ning)膠(jiao)，凝(ning)膠(jiao)溫度降至60℃左右時(shi)加入10000×SYBR，使染料終濃度為1×，如40ml凝膠溶液中(zhong)加入4μl染料。
2. 上樣(yang)、電(dian)泳后紫外燈下(xia)觀察。
● SYBR Green使用注意事項
1．后染(ran)方(fang)法是(shi)推(tui)薦(jian)方(fang)法，能得到(dao)更好(hao)的電泳(yong)結果；由于SYBR對樣(yang)品過量(liang)非常敏感(gan)，預染方法容易出現條帶扭(niu)曲(qu)變形（建議泳道中每條帶的含量(liang)不要超過5ng），請根據實際情況摸索出適合(he)自己的實驗程序，
2. SRBR對(dui)電泳(yong)緩沖液的pH要(yao)求(qiu)嚴格，有效pH為7.5-8.0，電泳時盡量使用新鮮配制的緩沖液(ye)，并保(bao)證(zheng)合(he)適的pH范(fan)圍。
3. SYBR Green 對玻璃和非(fei)聚丙(bing)烯(xi)(xi)材料具有一定親合(he)力(li)。建議在稀釋(shi)、貯存、染色等(deng)使用過(guo)程中(zhong)用聚丙(bing)烯(xi)(xi)類容器。
4. 使用酒精(jing)沉淀核酸中，SYBR Green可以(yi)全部(bu)從雙鏈核酸上去掉。
5. 如果想對用(yong) SYBR Green染過的膠(jiao)進行 Southern blot，建議(yi)在(zai)預雜交和雜交溶液(ye)中(zhong)加入 0.1%- 0.3% 的SDS，可以有效去(qu)除SYBR。