10×Tris-醋酸轉(zhuan)膜緩沖液（濕轉(zhuan)，粉(fen)末型）
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產(chan)品編號
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產品名稱
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規格(ge)
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TA5030P
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10×Tris-醋(cu)酸轉膜緩沖液（濕轉，粉末(mo)型(xing)）
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500 ml
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● 簡介(jie)：
10×Tris-醋酸(suan)轉膜緩(huan)沖液(ye)(ye)是專門用(yong)于(yu)Tris-醋酸(suan)系統分離高分子量(liang)蛋白后轉膜的(de)緩(huan)沖液(ye)(ye)。建議用(yong)于(yu)Western時濕轉轉膜，為方便客戶(hu)使用(yong)，10×轉膜緩(huan)沖液(ye)(ye)中沒(mei)有添加甲醇(chun)和SDS，客戶(hu)根據需要(yao)配制1×轉膜緩(huan)沖液(ye)(ye)時自行添加。
● 保存、運輸(shu)和貯存：
常溫保存，有效期兩(liang)年。
配(pei)成溶液后建議4℃保存，有效期6個月(yue)。
1×即(ji)用(yong)(yong)型轉膜(mo)緩沖液建議(yi)現(xian)用(yong)(yong)現(xian)配，不建議(yi)保存。
● 轉膜緩(huan)沖(chong)液配制：
1. 10×Tris-醋酸轉(zhuan)膜緩(huan)沖液(ye)（溶液(ye)型）配(pei)制(zhi)：
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原(yuan)料
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10×Tris-醋酸轉膜緩沖液（溶液型）500 ml
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10×Tris-醋酸轉膜緩沖液（濕(shi)轉，粉(fen)末型）
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取TA5030P全部粉末溶于500 ml超純水中，即(ji)配制成500 ml 10×Tris-醋酸轉膜緩(huan)沖液（溶液型）
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2. 1×即用(yong)型Tris-醋酸(suan)轉膜緩沖(chong)液配制：
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1×即(ji)用型轉(zhuan)膜緩沖液 配制量 1升
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10×Tris-醋(cu)酸(suan)轉(zhuan)膜緩沖液(溶液(ye)型)
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100
ml
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變性蛋白
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非(fei)變性蛋白
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＜20 kD蛋白
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無水甲(jia)醇
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20%
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5-10%
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SDS
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0.01%
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0.01%
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20-80 kD蛋(dan)白
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無水甲醇
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10%
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0-5%
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SDS
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0.05%
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0.05%
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＞80 kD蛋白
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無水(shui)甲醇
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10%（NC膜(mo)）
0-5%（PVDF膜）
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0%
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SDS
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0.1%
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0.1%
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超純水
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定容至1升(sheng)，不(bu)要(yao)調節pH，pH~7.2
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注：甲醇(chun)和SDS在轉膜(mo)中有(you)拮抗作用。甲醇(chun)使(shi)蛋(dan)白更加結合在膜(mo)上，而SDS讓蛋(dan)白更加離開膜(mo)。因(yin)此(ci)對(dui)大(da)蛋(dan)白轉膜(mo)來說，多(duo)加SDS，少(shao)加甲醇(chun)；而對(dui)小(xiao)蛋(dan)白轉膜(mo)，多(duo)加甲醇(chun)，少(shao)加SDS。
● 轉膜：
1. 膜(mo)的選擇(ze)：轉膜(mo)可以選擇(ze)PVDF膜(mo)或NC膜(mo)。根(gen)據蛋白大(da)小選擇(ze)膜(mo)的孔徑。一般說來，大(da)于20 kD蛋白選擇(ze)0.45
μm孔徑，低于20 kD選擇(ze)0.22 μm孔徑。PVDF膜(mo)使(shi)用(yong)前要用(yong)無水(shui)甲醇潤濕活化(hua)。
蛋白轉膜三(san)明治制(zhi)作：
負(fu)極（電轉夾黑色面）-海綿墊(dian)-1層1
mm厚(hou)度濾(lv)紙(zhi)-凝(ning)膠(jiao)-膜(mo)-1層1
mm厚(hou)度濾(lv)紙(zhi)-海綿墊(dian)-正極（電轉夾白色面）
3. 轉膜條(tiao)件(jian)：
以下(xia)轉(zhuan)膜(mo)條件(jian)僅供參考，客戶(hu)針對自(zi)己的(de)目(mu)的(de)蛋白，最好(hao)經過(guo)1-2次預(yu)實(shi)驗后，確定最佳的(de)轉(zhuan)膜(mo)條件(jian)。
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膜孔(kong)徑
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蛋白大小(xiao)
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穩流
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建(jian)議(yi)時(shi)間
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降(jiang)溫(wen)措施
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0.22 μm
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低(di)于20 kD
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200 mA
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~30分鐘
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不需要
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0.45 μm
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20-50 kD
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300 mA
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~45分鐘
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需(xu)要
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0.45 μm
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50-200 kD
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350 mA
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~50分鐘
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需要
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0.45 μm
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高(gao)于200
kD
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350 mA
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~2.5-4.5小時
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需要
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