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Western快速封閉液
Rapid Blocking Buffer for WB
● 產品組成:
貨號 |
名稱(cheng) |
規格 |
保(bao)存條件 |
WR5020-100ml |
Western快速封閉液 |
100 ml |
2-8℃ |
WR5020-500ml |
Western快速封閉液 |
500 ml |
2-8℃ |
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說明書(shu) |
一份 |
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● 產品簡介:
本產(chan)品專(zhuan)為快(kuai)速高效(xiao)封閉(bi)Western Blot 轉印膜而(er)設(she)計,避免抗(kang)(kang)體(ti)(ti)與封閉(bi)劑的(de)(de)(de)非特異(yi)結合(he),最大程度地降低了背景。同時,本封閉(bi)劑無內源(yuan)的(de)(de)(de)磷酸(suan)化蛋白及生(sheng)物(wu)素,對(dui)(dui)磷酸(suan)化特異(yi)抗(kang)(kang)體(ti)(ti)及生(sheng)物(wu)素檢(jian)測(ce)也(ye)不(bu)會產(chan)生(sheng)干擾(rao)。本封閉(bi)劑不(bu)與蛋白產(chan)生(sheng)非特異(yi)性結合(he),因而(er)只封閉(bi)膜而(er)不(bu)會屏蔽樣品蛋白的(de)(de)(de)抗(kang)(kang)體(ti)(ti)識(shi)別位點,大大提高了抗(kang)(kang)體(ti)(ti)檢(jian)測(ce)靈敏度。實驗表明,本封閉(bi)劑對(dui)(dui)許多抗(kang)(kang)體(ti)(ti)都有不(bu)同程度的(de)(de)(de)信(xin)號增強(qiang)(qiang)作(zuo)(zuo)用。然而(er)這種信(xin)號增強(qiang)(qiang)作(zuo)(zuo)用因抗(kang)(kang)體(ti)(ti)而(er)異(yi),對(dui)(dui)某一特定(ding)抗(kang)(kang)體(ti)(ti),并不(bu)一定(ding)具有確定(ding)的(de)(de)(de)信(xin)號增強(qiang)(qiang)作(zuo)(zuo)用。
注意: 沒有任何一(yi)種封(feng)閉劑(ji)能適(shi)合(he)所(suo)有抗(kang)原和抗(kang)體的檢測系統。如(ru)(ru)出現本試(shi)劑(ji)不適(shi)合(he)的抗(kang)體,請替換使用(yong)其它種類的封(feng)閉劑(ji)如(ru)(ru)BSA或脫脂奶粉等。
● 貯存、效期及運輸:
2-8℃貯存,有效期一年,常溫(wen)運(yun)輸。
● 注意事項:
1. 快速高效:5-10 min內完(wan)成封(feng)閉;只結合封(feng)閉轉印膜而不結合蛋白(bai),因此(ci)不會屏蔽(bi)樣(yang)品蛋白(bai)的(de)抗體識別位點,與傳統的(de)脫脂奶粉和BSA 封(feng)閉相比(bi)信噪(zao)比(bi)更(geng)高;
2. 方便快捷:無需稀(xi)釋,即(ji)取即(ji)用;
3. 性能(neng)可(ke)靠:與抗體無交(jiao)叉反(fan)應;
4. 應用(yong)范圍廣:無(wu)磷(lin)(lin)酸化蛋白,無(wu)生物素,尤其適合(he)磷(lin)(lin)酸化特異抗體(ti)及(ji)生物素檢(jian)測系(xi)統;
5. 節省抗體(ti):使用本封閉劑(ji)后,所需的最適抗體(ti)濃度低(di)于常規使用濃度,可大(da)大(da)節省抗體(ti)使用量(liang)。
6. 與(yu)PVDF膜(mo)相比,NC膜(mo)需要(yao)更(geng)長時間(jian)的封閉。
● 使用說明:
1. 本產品無需稀(xi)釋,開(kai)蓋(gai)即用(yong)。
2. 完成轉(zhuan)膜后(hou),使用TBST漂洗轉(zhuan)印膜3次(ci),每(mei)次(ci)5分鐘;
3. 將(jiang)轉(zhuan)印膜放入到雜交孵育盒中(zhong),加(jia)入10-20 ml快速(su)封(feng)閉(bi)液完全覆蓋轉(zhuan)印膜,置(zhi)于搖床輕輕搖動,參考下表確定封(feng)閉(bi)時間(jian):
膜類型 |
推薦封閉時間 |
反(fan)應溫度 |
PVDF膜 |
5-10分鐘 |
常溫 25度(du) |
NC膜(mo) |
10-20 分鐘 |
常溫25度 |
注意:使(shi)用本產品(pin),PVDF膜(mo)和NC膜(mo)使(shi)用推(tui)薦封閉(bi)時間,經多種抗體(ti)的(de)測(ce)試封閉(bi)效(xiao)果顯著優于常規的(de)BSA封閉(bi)1 h。對于一些背景非常高的(de)抗體(ti),可(ke)以嘗試延長(chang)封閉(bi)時間。如有特殊(shu)需要,也可(ke)4℃封閉(bi)過夜。
4. 封閉結束后棄去封閉液,進行Western Blot后續操作。
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