G418溶液(50mg/ml)
G418 Solution(50mg/ml)
● 產品包裝:
產品編號
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產品名(ming)稱
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產品包(bao)裝
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說(shuo)明書
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GM34581S
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G418溶液(ye)(50mg/ml)
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20 ml
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1份(fen)
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● 產品簡介:
G418是一種氨基糖苷類抗生素(MW: 692.71,Molecular formula: C20H40N4O10?2H2SO4,CAS: 108321-42-2),在(zai)細(xi)菌,酵(jiao)母(mu),原(yuan)生動物(wu),高等(deng)植物(wu)及哺(bu)乳(ru)動物(wu)這類原(yuan)核或(huo)真(zhen)核細(xi)胞中(zhong)抑制(zhi)蛋白(bai)(bai)合(he)成,廣(guang)泛(fan)(fan)應(ying)用于轉(zhuan)化(hua)了含(han)抗(kang)新霉素基(ji)因(yin)質粒的(de)真(zhen)核細(xi)胞的(de)篩選。G418通過抑制(zhi)轉(zhuan)座子Tn601,Tn5 的(de)基(ji)因(yin),干擾核糖體功能而阻斷蛋白(bai)(bai)質合(he)成,對原(yuan)核和真(zhen)核等(deng)細(xi)胞產生毒素。當neo基(ji)因(yin)被(bei)整合(he)進真(zhen)核細(xi)胞DNA后,則能啟動neo基(ji)因(yin)編碼的(de)序列轉(zhuan)錄(lu)為mRNA,從而獲得抗(kang)性(xing)產物(wu)氨基(ji)糖苷(gan)磷酸轉(zhuan)移酶(NPT)的(de)高效表達,使細(xi)胞獲得抗(kang)性(xing)而能在(zai)含(han)有G418的(de)選擇性(xing)培(pei)養基(ji)中(zhong)生長。G418的(de)這一(yi)選擇特性(xing),已在(zai)基(ji)因(yin)轉(zhuan)移、基(ji)因(yin)敲除、抗(kang)性(xing)篩選以及轉(zhuan)基(ji)因(yin)動物(wu)等(deng)方面得以廣(guang)泛(fan)(fan)應(ying)用。
由(you)于每種細胞(bao)對G418的(de)(de)(de)敏感性不(bu)同(tong)(tong),而且不(bu)同(tong)(tong)的(de)(de)(de)廠家(jia)生產的(de)(de)(de)相同(tong)(tong)濃(nong)度的(de)(de)(de)G418的(de)(de)(de)活(huo)性不(bu)盡相同(tong)(tong),所(suo)以在篩選(xuan)(xuan)之前,一(yi)定(ding)要(yao)確定(ding)G418的(de)(de)(de)最佳篩選(xuan)(xuan)濃(nong)度。具(ju)體如下:將細胞(bao)稀釋到(dao)1000個細胞(bao)/ml,在100μg/ml-1mg/ml的(de)(de)(de)G418濃(nong)度范圍內進行(xing)篩選(xuan)(xuan),選(xuan)(xuan)擇出在10~14天內使(shi)細胞(bao)全部(bu)死(si)亡(wang)的(de)(de)(de)最低G418濃(nong)度來進行(xing)下一(yi)步(bu)的(de)(de)(de)篩選(xuan)(xuan)試驗。
G418溶液已經0.22μm抽濾除菌,可(ke)以直接使用。
細胞系或機體
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G418推薦(jian)濃度(μg/ml)
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中國倉鼠卵巢細胞(bao)
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700-800
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Madin-Darby犬腎細胞
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500
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人上皮A431細胞
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400
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猿CV-1細胞(bao)
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500
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盤基網(wang)柄菌屬
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10-35
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植物(wu)
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10
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酵母
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125-500
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● 保存條件:
4-8℃保存,濕冰運輸。有效期2年。
● References
1. Loebenberg, D., et
al., G 418, a new micrommomospora-produced aminglycoside with activity
apainst protozoa and helminths: antiparasitic activity. Antimicrob. Agents Chemother., 7, 811 (1975).