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RealRed核酸染色劑(GelRed)
● 產品規格:
產品編號
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產品(pin)名稱
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包(bao)裝
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貯存
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運輸
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GR001
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RealRed核酸(suan)凝(ning)膠(jiao)染色劑
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0.5 ml
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4-8℃
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常(chang)溫
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-
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說明書
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一(yi)份
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● 簡介:
RealRed?是一種可以替代溴(xiu)化(hua)乙錠(EB)的(de)紅(hong)色熒光核酸(suan)染色劑,與GelRed是類似產品。與SYBR或(huo)EB相比,RealRed最顯著的(de)特性是其在多種條(tiao)件下(xia)的(de)高靈敏性和(he)穩定性。另外相對EB或(huo)SYBR,RealRed?誘導突變的(de)能力(li)極(ji)低(di)。染色劑溶(rong)解于(yu)水中(zhong),為(wei)10000×濃(nong)度。
● 貯存及運輸:
4-8℃避光保存2年(nian);常溫運(yun)輸。
● RealRed的使用方法:
注意:染料使用前應在室溫下徹底融化混勻后使用。
1. RealRed預染方法(推薦方法):
1.1
將(jiang)RealRed試(shi)劑(ji)按1:10000溶(rong)(rong)于(yu)瓊脂糖凝(ning)(ning)膠溶(rong)(rong)液(ye)(ye)中(zhong)(zhong),充分混勻。(例如:將(jiang)5 μl RealRed 試(shi)劑(ji)加入到50 ml 凝(ning)(ning)膠溶(rong)(rong)液(ye)(ye)中(zhong)(zhong))。注:由于(yu)RealRed 具有出色的(de)熱穩定性,可將(jiang)試(shi)劑(ji)直(zhi)接加入高溫的(de)凝(ning)(ning)膠溶(rong)(rong)液(ye)(ye)中(zhong)(zhong),而不用(yong)等凝(ning)(ning)膠溶(rong)(rong)液(ye)(ye)冷卻后再加入。
1.2 澆(jiao)制(zhi)凝膠并使其凝固(gu)后上樣電泳。
注意:使(shi)用(yong)這(zhe)種(zhong)預先加入染色劑的瓊脂糖凝膠,每(mei)次不易(yi)加入太多的 DNA 樣(yang)品,否則容(rong)易(yi)造成飽和現象(xiang),可以做多個不同濃(nong)度的 DNA Marker,以確定最佳 DNA 上(shang)樣(yang)量。
1.3 紫外(wai)下觀察結(jie)果。
注:如果始終出現拖尾或是條帶無法分離的現象,您可以使用后染法對DNA染色(se),以(yi)確認(ren)問(wen)(wen)題(ti)是否與染色(se)劑有(you)關。如果(guo)使用后(hou)染法問(wen)(wen)題(ti)依(yi)舊存在,則說明(ming)問(wen)(wen)題(ti)與染色(se)劑無(wu)關,請嘗(chang)試減(jian)少核酸(suan)的(de)上樣(yang)量后(hou)進行電泳。
2. RealRed后染方法:
2.1 用H2O將RealRed稀釋約3,300倍到0.1MNacl中,制成3×染色溶液。(例如:將15 μl RealRed和5ml的1MNaCl加入到45 ml H2O中)。注:RealRed 1×染色溶液同樣可用于后染,但其靈敏度要低于3×染色溶液。
2.2
將凝(ning)膠(jiao)(jiao)小心(xin)地放(fang)入合適的容器(qi)中,如聚丙(bing)烯容器(qi)中。緩慢加(jia)入足量的3×染(ran)色溶液浸沒凝(ning)膠(jiao)(jiao)。
2.3 在室溫下(xia)輕輕地搖(yao)動(dong)凝(ning)膠(jiao)(jiao)板,最佳的(de)染(ran)膠(jiao)(jiao)時(shi)間(jian)為30
分鐘(zhong),這(zhe)取(qu)決于(yu)凝(ning)膠(jiao)(jiao)板的(de)厚度(du)、瓊脂(zhi)糖或聚(ju)丙烯酰(xian)胺的(de)濃(nong)度(du)和(he) DNA 的(de)長短。凝(ning)膠(jiao)(jiao)越(yue)厚或瓊脂(zhi)糖的(de)濃(nong)度(du)越(yue)高,染(ran)色所需(xu)要的(de)時(shi)間(jian)就越(yue)長。注:染(ran)色溶液(ye)至(zhi)少可重復(fu)使用(yong)2-3次。如(ru)果不是立即(ji)再(zai)用(yong)的(de)話,建議(yi)將用(yong)過的(de)染(ran)色溶液(ye)冷藏保存。
2.4
紫外下觀察結果。