蛋白酶抑制劑混合物(100×,通用型)
產品編號
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規格
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貯存
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運輸
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PC1930-01
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1 ml
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-20℃
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濕冰
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PC1930-02
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5×1 ml
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-20℃
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濕冰
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● 儲存條件
-20℃保存,有效(xiao)期(qi)一(yi)年(nian)。
● 產品簡介
蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑混(hun)合物(通用(yong)(yong)型,
100×) (Protease inhibitor cocktail for general use, 100×)
是(shi)一種(zhong)通用(yong)(yong)型用(yong)(yong)于(yu)細胞或(huo)組織蛋(dan)白(bai)提取(qu)等的蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制劑混(hun)合物(200mMAEBSF,
30μM Aprotinin, 1 mMBestatin,1.4mME64 and 1mMLeupeptin in DMSO),并(bing)提供(gong)獨立包裝(zhuang)的0.1MEDTA。EDTA為(wei)單獨包裝(zhuang),以便選擇性(xing)使用(yong)(yong)。如用(yong)(yong)于(yu)檢測金屬蛋(dan)白(bai)酶(mei)活性(xing),則(ze)不宜添加EDTA。
細胞或(huo)組織(zhi)提(ti)(ti)取物等(deng)樣品中(zhong)含有許多內源性的蛋(dan)白酶、磷酸酶等(deng),容易導致提(ti)(ti)取物中(zhong)的蛋(dan)白降解或(huo)去修(xiu)飾,從而影響后續的蛋(dan)白檢測(ce)。因(yin)此在提(ti)(ti)取物等(deng)樣品中(zhong)添加適當(dang)的蛋(dan)白酶、磷酸酶等(deng)抑(yi)制劑是防止蛋(dan)白降解和去修(xiu)飾的有效方法。
本產品為經優化和測試的用(yong)于常(chang)規(gui)細胞或組(zu)織蛋白(bai)提取等的蛋白(bai)酶(mei)抑(yi)制(zhi)(zhi)劑(ji)混合物(wu),包含了(le)廣(guang)譜的絲氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白(bai)酶(mei)抑(yi)制(zhi)(zhi)劑(ji)以及氨基(ji)肽酶(mei)抑(yi)制(zhi)(zhi)劑(ji)。
本產品使用(yong)便捷,通常(chang)(chang)以1:100的比(bi)例分(fen)別把蛋(dan)白酶(mei)抑制劑混合(he)物(通用(yong)型(xing),
100×)和0.1MEDTA(100×)加入裂解液中,即可(ke)用(yong)于常(chang)(chang)規的細胞或組織蛋(dan)白的提取,并有(you)效抑制蛋(dan)白降解。
本產品(pin)可(ke)以有效抑制(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)常(chang)規細胞或組(zu)織(zhi)提取物中(zhong)的各(ge)種(zhong)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)活性(xing)(xing),如(ru)絲(si)氨(an)(an)(an)(an)酸(suan)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)、氨(an)(an)(an)(an)基肽酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)、半胱(guang)氨(an)(an)(an)(an)酸(suan)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)、蘇氨(an)(an)(an)(an)酸(suan)和(he)天(tian)冬氨(an)(an)(an)(an)酸(suan)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)、金屬蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)等(deng)。其中(zhong)AEBSF是(shi)一種(zhong)水溶(rong)(rong)(rong)(rong)性(xing)(xing)的絲(si)氨(an)(an)(an)(an)酸(suan)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)不(bu)可(ke)逆(ni)抑制(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)劑(ji)(ji)(ji),其抑制(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)常(chang)數與PMSF和(he)DFP的抑制(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)常(chang)數相似,可(ke)以有效抑制(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)胰蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(trypsin)、糜(mi)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(chymotrypsin)、纖溶(rong)(rong)(rong)(rong)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(plasmin)、激肽釋放(fang)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(kallikrein)和(he)凝血酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(thrombin)等(deng)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei),作為PMSF和(he)DFP的替代物,AEBSF的毒(du)性(xing)(xing)更低(di)、水溶(rong)(rong)(rong)(rong)性(xing)(xing)和(he)水溶(rong)(rong)(rong)(rong)液穩(wen)定性(xing)(xing)更好。Aprotinin是(shi)絲(si)氨(an)(an)(an)(an)酸(suan)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)的競爭性(xing)(xing)可(ke)逆(ni)抑制(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)劑(ji)(ji)(ji);Bestatin是(shi)氨(an)(an)(an)(an)基肽酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)可(ke)逆(ni)抑制(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)劑(ji)(ji)(ji);E64是(shi)半胱(guang)氨(an)(an)(an)(an)酸(suan)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)不(bu)可(ke)逆(ni)抑制(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)劑(ji)(ji)(ji);Leupeptin是(shi)絲(si)氨(an)(an)(an)(an)酸(suan)和(he)半胱(guang)氨(an)(an)(an)(an)酸(suan)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)可(ke)逆(ni)抑制(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)劑(ji)(ji)(ji);EDTA作為螯合(he)劑(ji)(ji)(ji)是(shi)金屬蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)酶(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)(mei)的可(ke)逆(ni)抑制(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)劑(ji)(ji)(ji)。
一個包裝的本(ben)產品(pin)通常足夠用于100ml裂解液的配制。
● 使用方法:
1.
本蛋白酶抑(yi)制劑混(hun)合物(wu)為100×的(de)(de)(de)儲存液(ye),使(shi)用(yong)時按(an)照1:100的(de)(de)(de)比(bi)例加入(ru)到(dao)裂(lie)解液(ye)中(zhong)(例如,1ml裂(lie)解液(ye)中(zhong)加入(ru)10μl蛋白酶抑(yi)制劑混(hun)合物(wu)),混(hun)勻后(hou)即(ji)可使(shi)用(yong)。含有蛋白酶抑(yi)制劑混(hun)合物(wu)的(de)(de)(de)裂(lie)解液(ye)宜(yi)現用(yong)現配,不宜(yi)配制后(hou)凍存待后(hou)續使(shi)用(yong)。根據(ju)需要,0.1M的(de)(de)(de)EDTA也按(an)照1:100的(de)(de)(de)比(bi)例加入(ru)到(dao)裂(lie)解液(ye)中(zhong)。
2.
待所需的抑制劑(ji)添(tian)加完畢混勻(yun)后,就(jiu)可以(yi)開始進行常規(gui)細胞或組織(zhi)的裂(lie)解和蛋(dan)白提取。
提示:蛋白酶抑制劑混合物盡量避免反復凍融,第一次使用后,可按照每次使用量分裝凍存。