Anti-β-Actin抗體(ti)(鼠單抗)
Anti-β-Actin Antibody(Monoclonal Antibody from Mouse)
產品(pin)編(bian)號
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產品名稱
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規格
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RGA2030
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Anti-β-Actin抗體(鼠單抗)
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20 μl
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● 產品簡介
來源
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用途及(ji)稀釋比例
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抗(kang)體類型(xing)
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β-Actin分子量
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Mouse
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WB 1:5000-10000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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單克隆抗體(ti)
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~45 kD
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注(zhu):WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF,
Immunofluorescence
Actin抗(kang)體用(yong)經(jing)過適(shi)當修飾的(de)人工合成(cheng)β-actin N-terminal一段多肽(tai)作為(wei)抗(kang)原制備(bei)而成(cheng)的(de)抗(kang)β-actin小鼠單克隆抗(kang)體。本(ben)Actin抗(kang)體在Western blot或免疫染色時僅識別β-actin。注意:本(ben)抗(kang)體不(bu)能用(yong)于檢(jian)測成(cheng)年(nian)動物心肌或骨骼(ge)肌的(de)β-actin。
Actin即肌動蛋白,是細胞(bao)的(de)一種重(zhong)要骨架(jia)蛋白,在細胞(bao)分泌、吞噬、locomotion、cytoplasmic、streaming和cytokinesis等(deng)過程中(zhong)起重(zhong)要作用。Actin大致(zhi)可分為六種,其(qi)中(zhong)四(si)種是不同(tong)肌肉組織特異性的(de),包(bao)括α-skeletal muscle actin,α-cardiac muscle actin,α-smooth muscle actin,和γ-smooth muscle actin;另外兩種廣(guang)泛分布(bu)于各(ge)種組織中(zhong),包(bao)括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同(tong)的(de)actin之(zhi)間(jian)同(tong)源性大于90%,但在N-terminal同(tong)源性僅(jin)50%-60%,因此(ci)N-terminal常被用作actin的(de)抗原。
β-actin的蛋(dan)白水平通常不(bu)會發生改變,因此被廣泛用(yong)于WB時(shi)上(shang)樣量是否一致的參(can)照(zhao),也常被用(yong)于免疫染色觀察細胞的微絲結構。在用(yong)作WB的參(can)照(zhao)時(shi),Actin抗體和Tubulin抗體的主要(yao)不(bu)同(tong)之處在于兩者(zhe)所(suo)識(shi)別蛋(dan)白的分子量不(bu)同(tong),這樣可以選擇(ze)合適(shi)的參(can)照(zhao)在同(tong)一張膜(mo)上(shang)實現同(tong)時(shi)檢測目(mu)標蛋(dan)白和參(can)照(zhao)蛋(dan)白。
本(ben)抗體如(ru)果用于常(chang)規的(de)Western檢(jian)測,至(zhi)少可以檢(jian)測20次。
● 貯存形式:
2 mg/ml抗體溶于PBS,50%甘油,pH7.2。
● 保存及運輸條件:
-20℃保存,一年(nian)有效;避(bi)免反復凍融;濕冰運輸。
● 使用說明:
1. Western Blot雜交(ECL顯色):1:5000-10000稀釋(shi),常溫孵(fu)育1-2 h或4℃過(guo)夜(ye)。
2. 免疫熒光(IF)和免疫組化(IHC):1:200-1000稀釋。
● 實(shi)驗示例:
樣品(pin):K562細(xi)胞(bao),SDS裂(lie)解液(貨(huo)號:RL1060)提取總蛋白(bai);
電泳:RTD6117 4-20% RealPAGE預制膠
轉膜(mo):NC膜(mo),1×RealBlot快速轉膜(mo)液快轉400 mA 30 min
封(feng)(feng)閉(bi):Western封(feng)(feng)閉(bi)液I(BSA)封(feng)(feng)閉(bi)60min
一抗(kang):Anti-β-Actin抗(kang)體(鼠單(dan)抗(kang))(貨號:RGA2030)
1:10000 RT 60min;
二抗(kang):HRP標記羊抗(kang)鼠IgG(貨(huo)號:HGM1060) 1:5000 RT 60min;
檢測:RealECL發光(guang)液(ye)(貨號:EC2520)自動(dong)曝光(guang)1秒