類(lei)囊體膜上樣緩(huan)沖液(10×)為類(lei)囊體膜提取試劑盒(貨號:RTU5002)內一組份,加入(ru)到增溶后的類(lei)囊體膜中,用于BN電泳。
將2.5 ml增溶(rong)緩沖液(2×)全部加(jia)(jia)入到增溶劑(ji)粉末中,加(jia)(jia)入滅菌水定容至5 ml,徹底混勻,即(ji)配成5 ml增溶緩沖液,適量分裝,-20℃貯存,盡量避(bi)免(mian)反復凍(dong)融。
1.9.1 取50 μl(濃度為1 mg Chl/ml)類囊體膜(mo)樣品(pin), 4℃ 16000 g離心5分鐘(zhong),棄上清(qing)。
1.9.2 沉淀中加入50 μl類囊(nang)體膜增(zeng)溶緩沖液重懸樣品(pin)(此時樣品(pin)濃度(du)為(wei)1 mg Chl/ml),輕柔混勻(yun),避免產生大量氣泡,冰浴10 min; 4℃ 16000 g離心(xin)15 min;上清為綠色,有微(wei)量沉淀。 注:如上(shang)清(qing)為無(wu)色,說(shuo)明(ming)增溶不好。
1.9.3 取上(shang)清(qing)移至新管中(大約(yue)可(ke)以取到(dao)45 μl上(shang)清(qing)),加入1/10體(ti)積的類囊體(ti)膜上(shang)樣緩(huan)沖液,BN-PAGE 3-12%或4-16%梯度膠(jiao)電泳(貨號:RTD6139-0312或RTD6139-0416),上(shang)樣體(ti)積5-15 μl。