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首頁 > 核酸生物學 > PCR相關 > DNA聚合酶

Real Taq DNA聚合酶

Real Taq DNA聚合酶

產(chan)品編號:RTC3102-02

產品規格:500U

相關(guan)規格:
數(shu)量(liang)
價(jia)格 ¥80

Real Taq DNA Polymerase

● 儲存(cun)條件(jian):-20 保(bao)存

● 濃    度(du): 5 U/ml

產(chan)品簡(jian)介(jie)

Real Taq DNA Polymerase是從克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大腸桿菌經誘導表達后分(fen)離純化的,其分(fen)子量為94 KD具有5’-3’DNA聚合酶(mei)活性(xing)和5’-3’外(wai)切(qie)核酸酶活性,無3’-5’外切(qie)酶(mei)活性。在PCR反應中,Real Taq DNA Polymerase延伸速度為1-2 kb/分鐘,產物3’端帶A,可直接用TA載體克隆。

活性定義

1單位(U) Real Taq DNA Polymerase活力定義為在7430分鐘內,以活性化的(de)大馬哈(ha)魚精子DNA作為模板/引物,將10 nmol脫(tuo)氧核苷酸摻入到酸不(bu)溶物質所需的酶量。

酶貯(zhu)存(cun)緩沖液(ye)

20 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mMEDTA;1 mMDTT;100 mMKCl ; Stabilizers; 50% glycerol

10×Taq Buffer

200 mM Tris-HCl (pH 8.4);200 mMKCl;15 mMMgCl2; 其它成分。

適用范圍

一般(ban)用(yong)于DNA片段的PCR擴增、DNA標記、引(yin)物延伸、序列(lie)測定、平末端加A等(deng),產物可(ke)以直(zhi)接(jie)用于T/A載體(ti)克隆(long)。

反應舉(ju)例(li):

注(zhu)意:以(yi)下(xia)舉例為常規(gui)PCR反應(ying)系統,僅(jin)供參(can)考(kao)。實際(ji)反應(ying)條件(jian)因模板、引物(wu)等的(de)結(jie)構不同而各(ge)異,需(xu)根(gen)據模板、目的(de)片段(duan)的(de)大小、堿基序(xu)列和引物(wu)長短等具體情(qing)況,設(she)定最(zui)佳反應(ying)條件(jian)。

以人基因組DNA為模板,擴增1 kb的片段

1. 反(fan)應體系的建立(li):50 ml反(fan)應體系如下(可根據(ju)比例放大或縮小反應體(ti)系(xi))

 

Template

<1mg

Primer 110 mM

1 ml

Primer 210 mM

1 ml

10×Taq Buffer

5 ml

dNTP Mixture(10 mM)

1 ml

Taq (5 U/ml)

0.5 ml

ddH2O

補至 50 ml

2.  PCR反應(ying)循(xun)環(huan)的設(she)置:

94 3 min

94 30 sec

55 30 sec      30 cycles

72 1 min

72 5 min

3.  結果檢測:反(fan)應(ying)結束后(hou)取5 ml反應產物,瓊脂糖凝膠電泳(yong)檢測。


 
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