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Real Taq DNA Polymerase

● 儲存條(tiao)件(jian):-20℃ 保存(cun)

● 濃    度: 5 U/ml

● 產(chan)品簡介

Real Taq DNA Polymerase是從(cong)克(ke)隆(long)有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大腸(chang)桿菌經誘導表達后(hou)分離(li)純化的，其(qi)分子量為(wei)94 KD。具(ju)有5’-3’DNA聚合酶(mei)活性和(he)5’-3’外切核酸酶活性，無(wu)3’-5’外切酶活性。在PCR反應中，Real Taq DNA Polymerase延(yan)伸(shen)速度為1-2 kb/分(fen)鐘，產物3’端帶A，可直接(jie)用TA載體(ti)克隆。

● 活(huo)性定義

1單(dan)位(U) Real Taq DNA Polymerase活力定(ding)義(yi)為在74℃、30分鐘(zhong)內，以活性化的大馬哈魚(yu)精子DNA作為模板/引物，將(jiang)10 nmol脫氧核苷酸摻(chan)入到酸不溶(rong)物質所需的酶量(liang)。

● 酶貯(zhu)存緩沖液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mMEDTA;1 mMDTT;100 mMKCl ; Stabilizers; 50% glycerol

● 10×Taq Buffer

200 mM Tris-HCl (pH 8.4);200 mMKCl;15 mMMgCl₂; 其它成分。

● 適用范圍

一般用于(yu)DNA片(pian)段的PCR擴增、DNA標記、引物延伸、序列測定、平末端(duan)加A等，產(chan)物(wu)可以直接(jie)用于T/A載體克隆(long)。

● 反(fan)應舉例：

注意(yi)：以下舉(ju)例為常規PCR反應(ying)系(xi)統(tong)，僅供參(can)考。實際反應(ying)條件因模板、引物等的(de)(de)結構不同而各(ge)異，需根(gen)據模板、目(mu)的(de)(de)片段的(de)(de)大小、堿(jian)基序列和引物長短等具體(ti)情(qing)況，設(she)定最佳反應(ying)條件。

以人基因組DNA為(wei)模(mo)板，擴(kuo)增(zeng)1 kb的片(pian)段

1. 反(fan)應(ying)體系的建立：50 ml反應體系如下(可根據比例(li)放大或縮小反應體系)：

2.  PCR反應循(xun)環的(de)設置：

94℃ 3 min

94℃ 30 sec

55℃ 30 sec      30 cycles

72℃ 1 min

72℃ 5 min

3.  結(jie)(jie)果檢測：反應結(jie)(jie)束(shu)后(hou)取5 ml反應(ying)產物，瓊(qiong)脂糖凝膠電泳檢測。