2×Taq PCR MasterMix
● 產品包(bao)裝：
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目錄號
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包裝
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價格
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2×MasterMix（不含染料）
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RTC3103-02
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500μl
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60元
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RTC3103-03
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5×500μl
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240元
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2×MasterMix（含染料）
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RTC3104-02
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500μl
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60元
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RTC3104-03
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5×500μl
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240元
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注(zhu)：以(yi)50μl PCR反應(ying)體系為例(li)，每次使用25μl 2×MasterMix，500μl可(ke)做20次 50μl PCR反應。
● 儲存條件: -20℃可長(chang)期保存(cun)；4℃穩(wen)定(ding)貯(zhu)存(cun)3個月。經常(chang)使用(yong)時，一旦融化后請4℃貯(zhu)存(cun)，盡量避免反復凍(dong)融。
● 產品簡(jian)介：
本產(chan)品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反(fan)應(ying)(ying)(ying)緩沖液、PCR反(fan)應(ying)(ying)(ying)的(de)增(zeng)強劑(ji)和優(you)化(hua)劑(ji)以及穩(wen)定劑(ji)，濃度為2×。使用(yong)時，只需補加實驗所需的(de)引物(wu)和模(mo)板后即(ji)可(ke)進行PCR反(fan)應(ying)(ying)(ying)，可(ke)最大限度的(de)減少人為誤差，具有快速簡便(bian)、穩(wen)定性好等優(you)點。適用(yong)于常規(gui)PCR反(fan)應(ying)(ying)(ying)、復(fu)雜模(mo)板（如GC含量(liang)高，有二級結(jie)構(gou)）的(de)擴(kuo)增(zeng)以及大規(gui)模(mo)基(ji)因檢(jian)測。使用(yong)該產(chan)品(pin)得(de)到的(de)PCR擴(kuo)增(zeng)產(chan)物(wu)末端含有一個A堿基(ji)，可(ke)以直接用(yong)于TA克隆。
● 質量控制：
經檢測無外(wai)源核酸酶活(huo)性；PCR方法檢測無宿主殘余基因(yin)組(zu)DNA；能有效地擴(kuo)增人基因(yin)組中的單(dan)拷貝基因(yin)。
● 使用(yong)說明：
1. 冰(bing)浴(yu)中徹底(di)融化(hua)2×MasterMix，混勻后(hou)Minispin將溶液收集到管底(di)。
2. 按照(zhao)下表在0.2ml PCR管中制備(bei)反應體系：
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50μl反(fan)應體系
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終濃度
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2×MasterMix
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25μl
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1×
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上游引物 10μM
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1-5μl
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0.2-0.8 μM
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下游引(yin)物 10μM
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1-5μl
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0.2-0.8 μM
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模(mo)板
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× μl
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10pg-1μg
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水
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補至(zhi)50μl
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3. 快(kuai)甩離心將(jiang)反應液收集到管底(di)。
4. PCR儀(yi)如果沒有熱蓋加(jia)熱的話，補(bu)加(jia)25μl礦物油。
5. PCR儀上(shang)執(zhi)行(xing)以下程序：
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步驟
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溫度(du)
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時間
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循環數
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初始(shi)變性
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94℃
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5 min
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1
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變性
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94℃
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30 sec
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25-40*
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退(tui)火
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Tm-5℃*
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30 sec
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延伸
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72℃
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1 min/kb
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最后延伸
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72℃
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5 min
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1
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*注： PCR 反(fan)應條(tiao)件(jian)(jian)視模板(ban)、引(yin)物等的(de)(de)(de)結(jie)構條(tiao)件(jian)(jian)不同而各(ge)異。在實際操(cao)作中需根據(ju)模板(ban)、目的(de)(de)(de)片段的(de)(de)(de)大小、堿基序列和引(yin)物的(de)(de)(de)長短等具體情況，設定最(zui)佳的(de)(de)(de)反(fan)應條(tiao)件(jian)(jian)（溫度、時(shi)間等）。
產品示例：
2×Taq PCR MasterMix擴增效果比較
M III：RTM403 DNA Marker III
lane 1：Rice 5000 bp
lane 2：Ricie 3000 bp
lane 3: Rice 600 bp