2×Taq PCR MasterMix
● 產品(pin)包裝:
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目(mu)錄號
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包裝
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價格
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2×MasterMix(不(bu)含染(ran)料)
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RTC3103-02
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500μl
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60元
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RTC3103-03
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5×500μl
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240元
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2×MasterMix(含染料)
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RTC3104-02
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500μl
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60元(yuan)
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RTC3104-03
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5×500μl
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240元
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注:以50μl PCR反應體系為例,每次(ci)使用25μl 2×MasterMix,500μl可做20次 50μl PCR反(fan)應。
● 儲存條件: -20℃可長(chang)期保存(cun);4℃穩(wen)定貯(zhu)(zhu)存(cun)3個月。經(jing)常使用(yong)時,一旦融化后請4℃貯(zhu)(zhu)存(cun),盡(jin)量避免反復凍融。
● 產品簡介:
本(ben)產品(pin)包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(ying)緩沖液(ye)、PCR反應(ying)的(de)(de)增強劑和優(you)化劑以(yi)(yi)及(ji)穩定劑,濃度(du)為2×。使用(yong)(yong)時,只(zhi)需(xu)補加實驗所(suo)需(xu)的(de)(de)引物和模板(ban)后(hou)即(ji)可(ke)進行PCR反應(ying),可(ke)最大限度(du)的(de)(de)減少人為誤(wu)差,具(ju)有快速簡便、穩定性(xing)好等優(you)點。適用(yong)(yong)于常規(gui)PCR反應(ying)、復雜模板(ban)(如GC含量(liang)高,有二級結構)的(de)(de)擴增以(yi)(yi)及(ji)大規(gui)模基(ji)因檢測。使用(yong)(yong)該產品得到的(de)(de)PCR擴增產物末端含有一個(ge)A堿(jian)基(ji),可(ke)以(yi)(yi)直接用(yong)(yong)于TA克隆(long)。
● 質量控制(zhi):
經檢測無(wu)外源核酸(suan)酶活性;PCR方法檢測無(wu)宿(su)主殘余基因組(zu)DNA;能有效地擴增人基(ji)因組中的單(dan)拷貝基(ji)因。
● 使用說明:
1. 冰(bing)浴(yu)中(zhong)徹底融化2×MasterMix,混勻后(hou)Minispin將溶液收(shou)集到管底。
2. 按照(zhao)下表在(zai)0.2ml PCR管中(zhong)制備反(fan)應體系(xi):
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50μl反(fan)應體系
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終濃度
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2×MasterMix
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25μl
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1×
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上游(you)引物 10μM
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1-5μl
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0.2-0.8 μM
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下游引物 10μM
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1-5μl
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0.2-0.8 μM
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模板
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× μl
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10pg-1μg
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水
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補至50μl
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3. 快甩離心將反應液收集到管底。
4. PCR儀如果沒有熱(re)蓋加熱(re)的話,補(bu)加25μl礦物油。
5. PCR儀上(shang)執行以下程序:
步驟
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溫度
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時間(jian)
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循(xun)環數(shu)
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初始變性(xing)
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94℃
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5 min
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1
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變性(xing)
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94℃
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30 sec
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25-40*
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退(tui)火
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Tm-5℃*
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30 sec
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延伸(shen)
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72℃
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1 min/kb
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最后延伸
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72℃
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5 min
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1
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*注: PCR 反(fan)應(ying)條(tiao)件視(shi)模板、引物等的(de)結構條(tiao)件不同而各異(yi)。在實(shi)際(ji)操作中需(xu)根據模板、目(mu)的(de)片段的(de)大小、堿(jian)基序列和引物的(de)長短等具體情況,設(she)定最佳的(de)反(fan)應(ying)條(tiao)件(溫度、時間等)。
產(chan)品示(shi)例:
2×Taq PCR MasterMix擴增效果比較
M III:RTM403 DNA Marker III
lane 1:Rice 5000 bp
lane 2:Ricie 3000 bp
lane 3: Rice 600 bp