瓊脂糖凝(ning)膠DNA回(hui)收試(shi)劑盒
● 試劑(ji)盒內容：
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試劑盒(he)組成
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RTP2201-02 （100次）
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RTP2201-03（200次）
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溶(rong)膠液(ye)PN
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100 ml
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2×100
ml
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3 M NaAc pH5.2
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500μl
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500μl
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漂洗(xi)液PW
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25 ml
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2×25 ml
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洗脫緩沖(chong)液(ye)EB
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15 ml
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15 ml
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吸附柱CA1
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100個
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2×100個
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收集管（2 ml）
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100個
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2×100個
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說(shuo)明書
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1份
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1份(fen)
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● 儲(chu)存條件：
本試劑盒在(zai)(zai)室(shi)溫(wen)(wen)(wen)（15–25℃）干燥條件下，可保存12個月；更長時(shi)(shi)間的保存可置于2–8℃。（注意：當低溫(wen)(wen)(wen)貯存時(shi)(shi)，使用前應先將試劑盒內的溶液在(zai)(zai)室(shi)溫(wen)(wen)(wen)中放置一段時(shi)(shi)間，必(bi)要時(shi)(shi)可在(zai)(zai)37℃水浴中預熱10-20分鐘(zhong)，以平衡(heng)溶液溫(wen)(wen)(wen)度。）
● 產(chan)品(pin)簡介(jie)：
本試劑盒采用可以高(gao)效(xiao)、專一結合DNA的(de)硅基質材料和獨特的(de)緩沖液系統(tong)，從TAE或TBE瓊脂糖(tang)凝膠(jiao)上(shang)回收DNA片段，同時(shi)去除蛋白質、其它(ta)有(you)機(ji)化合物、無機(ji)鹽(yan)離子(zi)及寡核苷(gan)酸引物等雜質。可回收100 bp–40 kb大小(xiao)的(de)片段，回收率大于80%（<100 bp 和>10kb 的(de)DNA片段回收率為(wei)30－50 %）。
每(mei)個吸附柱每(mei)次最多可吸附的DNA量約為20
μg。
使用(yong)本試劑(ji)盒(he)回收的DNA可適用(yong)于各種(zhong)常規操作，包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接(jie)和轉化等(deng)實(shi)驗。
● 產品(pin)特(te)點：
1 溶(rong)膠液PN為亮黃色，便于觀(guan)察(cha)膠是否徹底融化和溶(rong)膠體系的pH是否合(he)適。
2 操作快捷，單個樣品操作少于(yu)15分鐘。
注意事項：請務必在使用本試(shi)劑盒之(zhi)前閱讀(du)此注意(yi)事項。
1 電(dian)(dian)泳(yong)時(shi)最好換(huan)用(yong)新鮮的(de)電(dian)(dian)泳(yong)緩沖液，以免影(ying)(ying)響電(dian)(dian)泳(yong)和回收效果(guo)；如有可能，盡量(liang)使用(yong)TAE系(xi)統，因(yin)為(wei)有研究指出(chu)使用(yong)TBE系(xi)統后，回收產物中的(de)痕量(liang)硼酸會(hui)影(ying)(ying)響后續的(de)酶切反應。
2 切膠(jiao)時，紫外照射時間應盡量短，以免對(dui)DNA造成損傷；請(qing)盡(jin)量去(qu)除(chu)不含目的(de)片段(duan)的(de)瓊脂(zhi)糖凝膠，這(zhe)將會對融膠很(hen)有幫助。
3 第(di)一次(ci)使用(yong)前請按照(zhao)標(biao)簽(qian)說明(ming)在漂洗液PW中加(jia)入無水乙醇(chun)，并(bing)做好(hao)標(biao)記，用(yong)完后緊(jin)擰瓶(ping)蓋。
● 操作步驟：
如非指出(chu)，所有離(li)心(xin)步驟均為使用(yong)臺(tai)式離(li)心(xin)機在室溫下離(li)心(xin)。
1 將(jiang)單一的目(mu)的DNA條帶(dai)從瓊脂(zhi)糖凝膠(jiao)中(zhong)切(qie)下(xia)（盡(jin)量切(qie)除多(duo)余(yu)部分）放入干凈(jing)的離心管中(zhong)，稱取重量。
2 向(xiang)膠(jiao)塊中加(jia)(jia)入(ru)3倍體(ti)(ti)積(ji)溶(rong)膠(jiao)液PN （如果凝膠(jiao)重為100mg，其體(ti)(ti)積(ji)可視為100 μl，則(ze)加(jia)(jia)入(ru)300 μl溶(rong)膠(jiao)液），55℃水(shui)浴放置10分鐘，其間不(bu)斷溫和地上(shang)下翻轉離(li)心管，以確(que)保膠(jiao)塊充分溶(rong)解。
注意：
① 如果(guo)此時(shi)溶(rong)膠液變為粉紅色(se)，請(qing)加(jia)入(ru)少量3MNaAc pH5.2（一般說(shuo)來，10μl足矣(yi)），使溶(rong)膠液變為黃色(se)再(zai)上柱離(li)心。
② 對于高濃度的凝膠（>2％），按照(zhao)100mg凝膠加入(ru)100μl滅菌(jun)水和600μl溶膠液PN的比(bi)例加入(ru)溶膠液PN。
③ 膠(jiao)塊(kuai)完全(quan)溶(rong)解(jie)后最好將膠(jiao)溶(rong)液溫度降至室(shi)溫再上柱(zhu)，因為(wei)吸附(fu)柱(zhu)在較高溫度時結合(he)DNA的(de)能力(li)較弱。
3
可(ke)選步驟：當目的片段<500bp時，如想提高回收效率，向溶膠體系(xi)種(zhong)加入1/3溶膠液PN體積(ji)的異(yi)丙醇（如使用300μl溶膠液，則加入100μl異丙醇(chun)），混勻，55℃溫浴(yu)1分鐘后再進(jin)行步(bu)驟(zou)4。當目(mu)的片(pian)段>500bp時，省(sheng)略(lve)此步(bu)驟(zou)，直(zhi)接進(jin)行步(bu)驟(zou)4。
4 將上一步所得溶液加入到吸(xi)附柱(zhu)(zhu)CA1中（吸(xi)附柱(zhu)(zhu)放入收集管(guan)中），室溫(wen)放置2分鐘，13,000
rpm離心60秒，倒掉收集管(guan)中的廢(fei)液，將吸(xi)附柱(zhu)(zhu)重新(xin)放入收集管(guan)中。
注(zhu)意(yi)：
1 吸(xi)附柱(zhu)CA的有效容積(ji)為700μl，如溶膠體(ti)系體(ti)積大于700μl，分(fen)次上柱，保(bao)證全部溶液都(dou)加到吸附柱中(zhong)。
2
<100bp和>10kb的片(pian)段(duan)請在室溫放置(zhi)10分(fen)鐘，這將會(hui)提高回(hui)收效(xiao)率(lv)。
5 向吸附柱中加入700μl漂洗(xi)液(ye)PW（使用前(qian)請先(xian)檢查是否(fou)已(yi)加入無水乙醇），13,000 rpm離(li)心60秒(miao)，倒掉廢液，將(jiang)吸附(fu)柱重新放(fang)入(ru)收集管(guan)中。
6 向吸(xi)附柱中加入500μl漂(piao)洗液(ye)(ye)PW，13,000
rpm離心30-60秒，倒掉廢液(ye)(ye)。
7 將離心吸附柱(zhu)CA1放回收集管中(zhong)，13,000 rpm離心2分鐘，盡量除去漂洗液。
注意：此(ci)步必不可少(shao)！如果漂洗液有殘留會影響(xiang)回收(shou)效率和DNA質量，進(jin)而影響下游實驗；離心后將吸附柱蓋子打開，室溫放(fang)置2分鐘，這(zhe)樣(yang)將有(you)助于徹底(di)揮發(fa)殘余乙醇(chun)。
8 將吸(xi)附柱放到(dao)一(yi)個干凈離心管中(zhong)，向吸(xi)附膜中(zhong)間(jian)位置懸空(kong)滴加適量(liang)洗脫緩沖液EB（一(yi)般不要少于30μl），室溫放置2分(fen)鐘(zhong)。13,000 rpm離心1分(fen)鐘(zhong)收(shou)集DNA溶液。
注意：
1可將洗脫緩沖(chong)液EB預熱到70℃后再加到吸附膜上，這樣可以提(ti)高(gao)洗脫(tuo)效率。
2 CA1柱的洗(xi)脫體積不應少于30
μl，體積過小(xiao)將(jiang)會降低回收效率。
3洗脫液的pH值(zhi)對于洗脫效率(lv)有(you)很大影響(xiang)。若用(yong)水做洗脫液應保(bao)證其pH值(zhi)在7.0-8.5范圍內，pH值低(di)于(yu)7.0會降低洗(xi)脫效率(lv)
9 DNA產(chan)物-20℃保存(cun)。
RTP2201 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒發表文章
1. [2008 IF=1.749] Development of a sequence-characterized
ampli?ed region marker for diagnosis of dwarf bunt of wheat and detection of
Tilletia controversa Kuhn.
Author: J.H. Liu, L. Gao, T.G. Liu and W.Q. Chen
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Letters in Applied Microbiology 2009,49,235-240
Institution：Institute of
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2. [2009 IF=2.435] Characterization of three new S-alleles
and development of an S-allele-specific PCR system for rapidly identifying the S-genotype
in apple cultivars.
Author: Shenshan Long, Maofu Li, Zhenhai Han, Kun Wang, Tianzhong Li
Product: RTP2201瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Tree Genetics & Genomes (2010)
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Institution：China
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Paper link：
3. [2010 IF=0.921] An ISSR-based Approach for the Molecular
Detection and Diagnosis of Dwarf Bunt of Wheat, Caused by Tilletia controversa
Kuhn.
Author: Li Gao,Wanquan Chen and Taiguo Liu
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: J Phytopathol 159:155–158 (2011)
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Author: Huagui Wang, Xiankai Liu, Erling Feng, Li Zhu, Dongshu Wang, Xiangru Liao,
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Journal: Curr Microbiol (2011) 62:703–709
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Author: Hongru Wang, Jun Fang, Chengzheng Liang, Minghui He, Qiye Li, and
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Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
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6. [2013 IF=1.687] Tobacco Arabinogalactan Protein NtEPc Can
Promote Banana (Musa AAA) Somatic Embryogenesis.
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Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Appl Biochem Biotechnol (2014)
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Institution：Haikou
Experimental Station, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences
Paper link：
7. [2020 IF=1.857] Characterization and Developmental
Expression Patterns of Four Hexamerin Genes in the Bumble Bee, Bombus
terrestris (Hymenoptera: Apidae).
Author: Yakai Tian, Yingping Qu,Kun Dong,Shaoyu He,Wu Jie, and Jiaxing Huang
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Journal of Insect Science (2021) 21(5): 13; 1–8
Institution：Institute of
Apicultural Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences
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8. [2022 IF= 1.7] VvAGAMOUS Affect Development of Four
Different Grape Species Ovary.
Author: Pengfei Zhang, Yuqin Zhang1, Qifeng Zhao, Tiequan Niu, Pengfei Wen and
Jinjun Liang
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Phyton-International Journal of
Experimental Botany (2023) , vol.92, no.4
Institution：College of
Horticulture, Shanxi Agricultural University
Paper link：