瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒
● 試劑盒內容：
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試劑(ji)盒組成
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RTP2201-02 （100次）
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RTP2201-03（200次）
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溶膠液PN
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100 ml
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2×100 ml
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3 M NaAc pH5.2
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500μl
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500μl
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漂(piao)洗(xi)液PW
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25 ml
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2×25 ml
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洗(xi)脫(tuo)緩沖(chong)液(ye)EB
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15 ml
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15 ml
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吸附柱(zhu)CA1
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100個
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2×100個(ge)
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收集(ji)管（2 ml）
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100個
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2×100個
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說(shuo)明(ming)書
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1份
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1份
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● 儲存條件：
本試劑盒在室溫（15–25℃）干燥條件下，可保存12個月；更長時間的保存可置于2–8℃。（注意：當低溫貯存時，使用前應先將試劑盒內的溶液在室溫中放置一段時間，必要時可在37℃水浴中預熱10-20分鐘，以平衡溶液溫度。）
● 產品簡介：
本試劑盒采用(yong)可(ke)以(yi)高效、專一(yi)結合DNA的硅基(ji)質材料和(he)獨特的緩(huan)沖液系(xi)統，從TAE或TBE瓊(qiong)脂(zhi)糖凝膠(jiao)上回收DNA片段(duan)，同時去除蛋白質、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷(gan)酸引物等(deng)雜(za)質。可(ke)回收100 bp–40 kb大小的片段(duan)，回收率大于80%（<100 bp 和(he)>10kb 的DNA片段(duan)回收率為30－50 %）。
每個吸附(fu)柱每次最多可吸附(fu)的DNA量(liang)約(yue)為(wei)20 μg。
使用(yong)本試劑盒(he)回收的DNA可(ke)適用(yong)于(yu)各種常規操作(zuo)，包括酶切、PCR、測(ce)序、文庫篩選、連接和(he)轉化(hua)等實(shi)驗。
● 產品特點：
1 溶(rong)膠液PN為亮黃色，便(bian)于(yu)觀察膠是否徹(che)底融化(hua)和溶(rong)膠體系的pH是否合適(shi)。
2 操作(zuo)快捷，單個樣(yang)品操作(zuo)少于15分(fen)鐘(zhong)。
注意事項：請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。
1 電(dian)泳(yong)時最好換用新鮮(xian)的(de)電(dian)泳(yong)緩沖液，以免(mian)影響電(dian)泳(yong)和回(hui)收(shou)效(xiao)果；如(ru)有可能，盡量使(shi)用TAE系統，因為(wei)有研究指出使(shi)用TBE系統后，回(hui)收(shou)產(chan)物中的(de)痕量硼酸(suan)會(hui)影響后續的(de)酶切反應(ying)。
2 切膠時，紫外照射時間應盡量短，以免對DNA造成損傷；請(qing)盡量去除不含目的片段的瓊(qiong)脂糖凝膠(jiao)，這將(jiang)會對融膠(jiao)很(hen)有幫助。
3 第一次使(shi)用前請按照標簽說(shuo)明在漂洗液PW中加(jia)入無水乙醇，并做好(hao)標記，用完(wan)后緊擰瓶蓋。
● 操作步驟：
如非指出，所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1 將單(dan)一(yi)的目的DNA條帶從瓊脂糖凝(ning)膠中切(qie)下(xia)（盡量切(qie)除多余部分）放入干凈的離心管中，稱取重量。
2 向膠塊中加入3倍體積溶膠液PN （如果凝膠重為100mg，其體積可視為100 μl，則加入300 μl溶膠液），55℃水浴放置10分鐘，其間不斷溫和地上下翻轉離心管，以確保膠塊充分溶解。
注意：
① 如果此(ci)時溶膠(jiao)液變(bian)為粉紅色，請加(jia)入少量3MNaAc pH5.2（一般說來，10μl足矣(yi)），使溶膠(jiao)液變(bian)為黃色再上(shang)柱(zhu)離心。
② 對于(yu)高濃度的凝膠(jiao)（>2％），按照100mg凝膠(jiao)加(jia)入100μl滅菌水和600μl溶膠(jiao)液PN的比例加(jia)入溶膠(jiao)液PN。
③ 膠(jiao)塊完全溶(rong)解后最好將(jiang)膠(jiao)溶(rong)液溫度降至室溫再上柱，因為吸(xi)附柱在(zai)較(jiao)高溫度時結合DNA的能力較(jiao)弱。
3 可選步(bu)(bu)驟(zou)：當目(mu)的(de)片段<500bp時，如想提(ti)高回收(shou)效率，向溶(rong)膠體(ti)系(xi)種加入1/3溶(rong)膠液(ye)PN體(ti)積的(de)異(yi)丙醇（如使用300μl溶(rong)膠液(ye)，則加入100μl異(yi)丙醇），混勻(yun)，55℃溫浴(yu)1分鐘后再進行(xing)步(bu)(bu)驟(zou)4。當目(mu)的(de)片段>500bp時，省略此步(bu)(bu)驟(zou)，直接(jie)進行(xing)步(bu)(bu)驟(zou)4。
4 將(jiang)上一(yi)步所得溶液(ye)加入到吸附(fu)(fu)柱(zhu)CA1中(zhong)(zhong)（吸附(fu)(fu)柱(zhu)放入收集管(guan)中(zhong)(zhong)），室溫放置2分鐘，13,000 rpm離心60秒，倒掉收集管(guan)中(zhong)(zhong)的廢液(ye)，將(jiang)吸附(fu)(fu)柱(zhu)重新放入收集管(guan)中(zhong)(zhong)。
注意：
1 吸附柱CA的有效容積為700μl，如溶膠體系體積大于700μl，分次上柱，保證全部溶液都加到吸附柱中。
2 <100bp和>10kb的片段請在室溫放置10分鐘，這將會提高回收效率。
5 向吸附柱中加入700μl漂洗液PW（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），13,000 rpm離心60秒(miao)，倒(dao)掉(diao)廢液，將(jiang)吸附柱重新放入收集管中。
6 向吸(xi)附柱(zhu)中加(jia)入500μl漂洗液(ye)PW，13,000 rpm離(li)心30-60秒，倒掉廢液(ye)。
7 將離(li)心(xin)吸附柱CA1放(fang)回收集管中，13,000 rpm離(li)心(xin)2分(fen)鐘，盡量除(chu)去(qu)漂洗液。
注意：此步必不可少！如果漂洗液有殘留會影響回收效率和DNA質量，進而影響下游實驗；離心后將吸附柱蓋子打開，室溫放置2分鐘，這樣將有助于徹底揮發殘余乙醇。
8 將(jiang)吸(xi)附(fu)柱(zhu)放到一個干凈離(li)心(xin)管中，向(xiang)吸(xi)附(fu)膜中間位置(zhi)懸空滴加適量(liang)洗脫(tuo)緩(huan)沖液(ye)EB（一般不要少于30μl），室溫(wen)放置(zhi)2分鐘(zhong)。13,000 rpm離(li)心(xin)1分鐘(zhong)收集DNA溶液(ye)。
注意：
1可將洗脫緩沖液EB預熱到70℃后再加到吸附膜上，這樣可以提高洗脫效率。
2 CA1柱的洗脫體積不應少于30 μl，體積過小將會降低回收效率。
3洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5范圍內，pH值低于7.0會降低洗脫效率
9 DNA產(chan)物-20℃保(bao)存(cun)。
RTP2201 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒發表文章
1. [2008 IF=1.749] Development of a sequence-characterized
ampli?ed region marker for diagnosis of dwarf bunt of wheat and detection of
Tilletia controversa Kuhn.
Author: J.H. Liu, L. Gao, T.G. Liu and W.Q. Chen
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Letters in Applied Microbiology 2009,49,235-240
Institution：Institute of
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2. [2009 IF=2.435] Characterization of three new S-alleles
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Author: Shenshan Long, Maofu Li, Zhenhai Han, Kun Wang, Tianzhong Li
Product: RTP2201瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Tree Genetics & Genomes (2010)
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Institution：China
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Paper link：
3. [2010 IF=0.921] An ISSR-based Approach for the Molecular
Detection and Diagnosis of Dwarf Bunt of Wheat, Caused by Tilletia controversa
Kuhn.
Author: Li Gao,Wanquan Chen and Taiguo Liu
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: J Phytopathol 159:155–158 (2011)
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Paper link：
4. [2010 IF=1.359] Curing the Plasmid pXO2 from Bacillus
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Author: Huagui Wang, Xiankai Liu, Erling Feng, Li Zhu, Dongshu Wang, Xiangru Liao,
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Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Curr Microbiol (2011) 62:703–709
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5. [2010 IF=1.993] Computation-assisted SiteFinding-PCR for
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Author: Hongru Wang, Jun Fang, Chengzheng Liang, Minghui He, Qiye Li, and
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Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
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6. [2013 IF=1.687] Tobacco Arabinogalactan Protein NtEPc Can
Promote Banana (Musa AAA) Somatic Embryogenesis.
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Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Appl Biochem Biotechnol (2014)
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7. [2020 IF=1.857] Characterization and Developmental
Expression Patterns of Four Hexamerin Genes in the Bumble Bee, Bombus
terrestris (Hymenoptera: Apidae).
Author: Yakai Tian, Yingping Qu,Kun Dong,Shaoyu He,Wu Jie, and Jiaxing Huang
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Journal of Insect Science (2021) 21(5): 13; 1–8
Institution：Institute of
Apicultural Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences
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8. [2022 IF= 1.7] VvAGAMOUS Affect Development of Four
Different Grape Species Ovary.
Author: Pengfei Zhang, Yuqin Zhang1, Qifeng Zhao, Tiequan Niu, Pengfei Wen and
Jinjun Liang
Product: RTP2201 瓊脂糖凝膠回收試劑盒
Journal: Phyton-International Journal of
Experimental Botany (2023) , vol.92, no.4
Institution：College of
Horticulture, Shanxi Agricultural University
Paper link：