PCR產物純化試劑盒(目錄號:RTP2202)
試劑盒內容及保存:
試劑(ji)盒組成
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RTP2202-02
(100次)
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RTP2202-03
(200次)
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貯(zhu)存方(fang)式
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結合液PB
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100 ml
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2×100ml
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室溫
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3 M NaAc pH5.2
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500 μl
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500 μl
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室溫
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漂洗液PW
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25 ml
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2×25
ml
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室(shi)溫(wen)
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洗脫緩沖液EB
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15 ml
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15 ml
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室溫(wen)
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吸附柱(zhu)CA2
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100個(ge)
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2×100個
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室溫
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收集管(2 ml)
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100個
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2×100個
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室溫
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說明書
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1份
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1份
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儲存條件:
本試劑盒在室溫(15–25℃)干燥條件下,可保存12個月;更長時間的保存可置于2–8℃。(注意:當低溫貯存時,使用前應先將試劑盒內的溶液在室溫中放置一段時間,必要時可在37℃水浴中預熱10-20分鐘,以平衡溶液溫度。)
產品簡介:
本試(shi)劑盒采用(yong)離心吸(xi)附柱結合獨特的(de)緩沖(chong)液系統,從酶切、PCR等反應溶液中(zhong)純化DNA片(pian)段,同(tong)時除(chu)去蛋(dan)白質、無機鹽離子及寡(gua)核(he)苷(gan)酸(suan)引物等雜質。使用(yong)本試(shi)劑盒可回收100bp–10kb的(de)DNA片(pian)段,回收率大于80%(<100 bp 和>10kb 的(de)DNA片(pian)段回收率為(wei)30-50 %)。
每個吸附(fu)柱每次最多可吸附(fu)的DNA量(liang)約為10 μg。
使用本試劑(ji)盒回收的DNA可(ke)適用于(yu)各種常規操作(zuo),包括酶切、測(ce)序、文庫篩選、連接和轉化(hua)等實驗。
產品特點:
1 結合液PB為亮(liang)黃色,便于(yu)觀察體系(xi)的pH是否合適(shi)。
2 操作快(kuai)捷,單個樣品操作少于10分鐘。
操作步驟:
如非指出,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1 在(zai)PCR反應液(ye)中(zhong)(zhong)直接加入5倍體積的(de)PB液(ye),顛倒混勻后,全部加入到(dao)吸附柱(zhu)CA2中(zhong)(zhong),10,000g離心30-60秒,到(dao)掉收集管中(zhong)(zhong)的(de)廢液(ye),將吸附柱(zhu)CA2重新放入收集管中(zhong)(zhong)。
注:● 如果(guo)PCR反應體系使(shi)用(yong)(yong)了(le)石蠟油,無需去除,但要使(shi)用(yong)(yong)10倍體積的(de)PB液。
● 如果(guo)反應體系小于50μl,用(yong)水(shui)補至50μl體系,再加入PB液。
● 如果體系體積大于700μl,請分次上柱(zhu),保(bao)證全部溶液(ye)均加入到吸附柱(zhu)中。
2
向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),10,000g離(li)心30-60秒,倒掉廢液,將(jiang)吸附柱重新放入收集(ji)管中。
3
向(xiang)吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW,10,000g離心30-60秒(miao),倒掉廢液。
4
將離(li)心吸(xi)附(fu)柱CA2放回收集(ji)管中,10,000g離(li)心2分鐘,盡(jin)量(liang)除去漂洗液。
注意:此步(bu)必不(bu)可少!如(ru)果漂洗液有殘留,將(jiang)會影(ying)響回收效率和(he)DNA質量(liang),進而影(ying)響下游實驗(yan);離心后將(jiang)吸附柱蓋子打(da)開(kai),室(shi)溫放置2分鐘,這(zhe)樣將(jiang)有助于徹底揮發殘余乙醇。
5 將吸附柱放(fang)到一個干凈離(li)(li)心管中(zhong),向吸附膜中(zhong)間位置懸(xuan)空滴加適量洗(xi)脫緩沖液EB,室(shi)溫放(fang)置2分鐘(zhong)。10,000g離(li)(li)心2分鐘(zhong)收集(ji)DNA溶液。
注意:
● 可將洗脫緩沖液EB預熱到60-70℃后再加到(dao)吸附膜上,這樣可以提高洗脫(tuo)效(xiao)率(lv)。
● CA2柱(zhu)的洗(xi)脫體(ti)積不應少于(yu)20
μl,體(ti)積過(guo)小將會降低回收效率。
● 洗脫(tuo)液的pH值對于(yu)洗脫(tuo)效率有很大影響(xiang)。若用水做(zuo)洗脫(tuo)液應保(bao)證其pH值在(zai)7.0-8.5范圍內,pH值低于(yu)7.0會降低洗脫(tuo)效率
6 DNA產物-20℃保存。
RTP2202 PCR產物純化試劑盒發表文章
1. [2012 IF=0.903] T Polymorphisms in major
histocompatibility complex class IIa genes are associated with resistance to
infectious hematopoietic necrosis in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss
(Walbaum, 1792).
Author: Z. Liu, D.-D. Hu, S.-J. Shao, J.-Q. Huang, J.-F. Wang and J. Yang
Product: RTP2202 PCR產物純化試劑盒
Journal: J. Appl. Ichthyol. 29 (2013), 1234–1240
Institution:College of
Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University
Paper link:
2. [2012 IF=1.958] Cloning, bioinformatics and the enzyme
activity analyses of a phenylalanine ammonia-lyase gene involved in dragon’s blood biosynthesis in Dracaena
cambodiana.
Author: Xing-Hong Wang,Changhe Zhang
Product: RTP2202 PCR產物純化試劑盒
Journal: Mol Biol Rep (2013) 40:97–107
Institution:Yunnan Institute
of Microbiology, Yunnan University
Paper link:
3. [2015 IF=1.32] Association between MHC II beta chain gene
polymorphisms and resistance to infectious haematopoietic necrosis virus in
rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792).
Author: Juan Yang, Zhe Liu, Hai-Na Shi, Jiu-Pan Zhang, Jian-Fu Wang, Jin-Qiang
Huang & Yu-Jun Kang
Product: RTP2202 PCR產物純化試劑盒
Journal: Aquaculture Research, 2016, 47,
570–578
Institution:College of
Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University
Paper link: //onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/are.12516