PCR產(chan)物純化(hua)試(shi)劑(ji)盒(he)(目(mu)錄號:RTP2202)
試劑盒(he)內容及保存:
試劑盒組成
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RTP2202-02
(100次)
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RTP2202-03
(200次)
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貯存方式(shi)
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結合液PB
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100 ml
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2×100ml
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室溫
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3 M NaAc pH5.2
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500 μl
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500 μl
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室溫
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漂洗液PW
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25 ml
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2×25
ml
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室溫(wen)
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洗脫緩沖液EB
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15 ml
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15 ml
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室溫
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吸附柱(zhu)CA2
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100個(ge)
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2×100個(ge)
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室溫
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收集管(2 ml)
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100個
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2×100個
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室溫
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說明(ming)書
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1份
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1份
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儲存(cun)條件:
本(ben)試(shi)劑盒在室(shi)溫(wen)(wen)(15–25℃)干(gan)燥條件下,可(ke)保存12個月(yue);更長時間的保存可(ke)置(zhi)于2–8℃。(注(zhu)意:當低溫(wen)(wen)貯(zhu)存時,使用(yong)前應(ying)先將試(shi)劑盒內的溶液在室(shi)溫(wen)(wen)中放(fang)置(zhi)一段(duan)時間,必要時可(ke)在37℃水浴(yu)中預熱10-20分鐘,以平(ping)衡溶液溫(wen)(wen)度。)
產品(pin)簡介:
本試(shi)劑盒(he)采用離(li)心吸附柱結(jie)合獨特的(de)(de)緩(huan)沖(chong)液系(xi)統(tong),從(cong)酶切(qie)、PCR等(deng)反(fan)應溶液中純化(hua)DNA片段,同時(shi)除(chu)去蛋白(bai)質、無(wu)機鹽(yan)離(li)子及(ji)寡核苷(gan)酸引物等(deng)雜(za)質。使用本試(shi)劑盒(he)可回收(shou)(shou)100bp–10kb的(de)(de)DNA片段,回收(shou)(shou)率大于80%(<100 bp 和>10kb 的(de)(de)DNA片段回收(shou)(shou)率為(wei)30-50 %)。
每個吸(xi)附柱每次最多(duo)可吸(xi)附的DNA量(liang)約為10 μg。
使用本試劑盒回收的DNA可適用于各(ge)種常規(gui)操作,包括酶(mei)切、測序(xu)、文庫篩選、連(lian)接和(he)轉化等實驗。
產品特點:
1 結合(he)液PB為亮黃(huang)色,便于觀(guan)察體系的pH是(shi)否(fou)合(he)適。
2 操作快捷(jie),單個樣品操作少于10分鐘。
操(cao)作(zuo)步驟:
如非(fei)指出,所有離心(xin)步驟均為(wei)使用臺(tai)式(shi)離心(xin)機在室溫下離心(xin)。
1 在(zai)PCR反應液(ye)中直(zhi)接加(jia)入(ru)5倍體(ti)積的(de)PB液(ye),顛(dian)倒混勻后,全部加(jia)入(ru)到吸附柱CA2中,10,000g離(li)心30-60秒(miao),到掉(diao)收集管(guan)中的(de)廢液(ye),將吸附柱CA2重新(xin)放入(ru)收集管(guan)中。
注:● 如果PCR反應體(ti)(ti)系(xi)使用了石蠟油,無需去除,但要使用10倍體(ti)(ti)積的(de)PB液。
● 如果反應體(ti)系小于50μl,用水補至50μl體(ti)系,再加(jia)入PB液(ye)。
● 如果(guo)體系體積大于700μl,請分次上柱,保證全部溶液均加入到(dao)吸(xi)附柱中。
2
向吸(xi)附(fu)柱CA2中加入700μl漂洗液PW(使用前請先檢查是否已加(jia)入無水乙(yi)醇(chun)),10,000g離心30-60秒,倒(dao)掉(diao)廢液(ye),將吸附柱重新放入(ru)收集管中。
3
向吸附柱CA2中(zhong)加入500μl漂洗液(ye)PW,10,000g離心30-60秒(miao),倒(dao)掉廢液(ye)。
4
將離(li)心(xin)吸附柱CA2放(fang)回收集管中,10,000g離(li)心(xin)2分(fen)鐘,盡量除去漂洗(xi)液。
注意:此(ci)步必不可少!如果漂洗液有(you)殘留,將會影響回收效率(lv)和(he)DNA質量,進而影響下游實驗;離心后將吸附柱蓋子(zi)打開,室溫(wen)放(fang)置2分鐘,這樣將有(you)助于(yu)徹(che)底揮(hui)發(fa)殘余乙醇(chun)。
5 將(jiang)吸(xi)附柱放到一個(ge)干(gan)凈離心管中,向吸(xi)附膜中間位置(zhi)懸空(kong)滴加適量洗脫緩(huan)沖液EB,室(shi)溫放置(zhi)2分鐘(zhong)。10,000g離心2分鐘(zhong)收(shou)集DNA溶液。
注意(yi):
● 可將洗脫緩沖(chong)液EB預(yu)熱到(dao)60-70℃后再(zai)加到吸附膜上,這(zhe)樣(yang)可以提高(gao)洗脫效率(lv)。
● CA2柱的(de)洗脫體積不應(ying)少于20
μl,體積過小將會降低(di)回收效率。
● 洗脫(tuo)液的(de)pH值(zhi)對于洗脫(tuo)效率(lv)有(you)很大影響。若用水做(zuo)洗脫(tuo)液應保證(zheng)其(qi)pH值(zhi)在7.0-8.5范圍內,pH值(zhi)低(di)于7.0會降低(di)洗脫(tuo)效率(lv)
6 DNA產物-20℃保存。
RTP2202 PCR產物純化試劑盒發表文章
1. [2012 IF=0.903] T Polymorphisms in major
histocompatibility complex class IIa genes are associated with resistance to
infectious hematopoietic necrosis in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss
(Walbaum, 1792).
Author: Z. Liu, D.-D. Hu, S.-J. Shao, J.-Q. Huang, J.-F. Wang and J. Yang
Product: RTP2202 PCR產物純化試劑盒
Journal: J. Appl. Ichthyol. 29 (2013), 1234–1240
Institution:College of
Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University
Paper link:
2. [2012 IF=1.958] Cloning, bioinformatics and the enzyme
activity analyses of a phenylalanine ammonia-lyase gene involved in dragon’s blood biosynthesis in Dracaena
cambodiana.
Author: Xing-Hong Wang,Changhe Zhang
Product: RTP2202 PCR產物純化試劑盒
Journal: Mol Biol Rep (2013) 40:97–107
Institution:Yunnan Institute
of Microbiology, Yunnan University
Paper link:
3. [2015 IF=1.32] Association between MHC II beta chain gene
polymorphisms and resistance to infectious haematopoietic necrosis virus in
rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792).
Author: Juan Yang, Zhe Liu, Hai-Na Shi, Jiu-Pan Zhang, Jian-Fu Wang, Jin-Qiang
Huang & Yu-Jun Kang
Product: RTP2202 PCR產物純化試劑盒
Journal: Aquaculture Research, 2016, 47,
570–578
Institution:College of
Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University
Paper link: //onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/are.12516