Western快速封閉液
Rapid Blocking Buffer for
WB
● 產品組成:
貨號
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名稱
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規格
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保存條件
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WR5020-100ml
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Western快速封閉液(ye)
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100 ml
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2-8℃
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WR5020-500ml
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Western快速封閉液
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500 ml
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2-8℃
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說明書
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一份
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● 產品簡介:
本產(chan)(chan)(chan)品專(zhuan)為快速高效封(feng)(feng)閉Western Blot 轉印膜(mo)而設計,避(bi)免抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)與封(feng)(feng)閉劑(ji)的(de)非特異結合,最大程度(du)地降低(di)了背景。同時(shi),本封(feng)(feng)閉劑(ji)無內源的(de)磷酸化(hua)蛋白及生(sheng)物素,對磷酸化(hua)特異抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)及生(sheng)物素檢測也不會(hui)產(chan)(chan)(chan)生(sheng)干擾(rao)。本封(feng)(feng)閉劑(ji)不與蛋白產(chan)(chan)(chan)生(sheng)非特異性結合,因而只封(feng)(feng)閉膜(mo)而不會(hui)屏(ping)蔽樣品蛋白的(de)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)識(shi)別位點,大大提高了抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)檢測靈敏度(du)。實驗表(biao)明,本封(feng)(feng)閉劑(ji)對許多抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)都有(you)不同程度(du)的(de)信(xin)號(hao)增(zeng)(zeng)強作(zuo)用(yong)(yong)。然而這(zhe)種信(xin)號(hao)增(zeng)(zeng)強作(zuo)用(yong)(yong)因抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)而異,對某一特定抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti),并不一定具有(you)確定的(de)信(xin)號(hao)增(zeng)(zeng)強作(zuo)用(yong)(yong)。
注意: 沒有(you)任何一種(zhong)封閉(bi)劑(ji)能(neng)適(shi)合(he)所有(you)抗(kang)原和抗(kang)體(ti)的(de)檢測(ce)系統(tong)。如出(chu)現本試劑(ji)不適(shi)合(he)的(de)抗(kang)體(ti),請替換使用其它(ta)種(zhong)類的(de)封閉(bi)劑(ji)如BSA或脫脂奶粉等。
● 貯存、效期及運輸:
2-8℃貯存,有效期一年,常溫運(yun)輸。
● 注意事項:
1. 快(kuai)速(su)高效:5-10 min內完成封(feng)閉;只(zhi)結合(he)封(feng)閉轉(zhuan)印膜(mo)而(er)不結合(he)蛋白,因此不會屏蔽樣品蛋白的抗(kang)體(ti)識別位(wei)點,與傳統的脫脂(zhi)奶粉和(he)BSA 封(feng)閉相比(bi)信噪比(bi)更(geng)高;
2. 方便快捷:無(wu)需稀釋,即(ji)取即(ji)用;
3. 性(xing)能可靠:與抗(kang)體(ti)無交叉反應;
4. 應用范圍廣:無磷酸化蛋(dan)白(bai),無生物素,尤其適合磷酸化特異抗體(ti)及生物素檢測(ce)系統(tong);
5. 節(jie)省抗體:使(shi)用本封閉(bi)劑后,所需的(de)最適抗體濃度低于常規使(shi)用濃度,可大大節(jie)省抗體使(shi)用量。
6. 與PVDF膜(mo)相(xiang)比,NC膜(mo)需(xu)要更長時間的封閉。
● 使用說明:
1. 本產品(pin)無需稀釋,開(kai)蓋即用。
2. 完成轉膜后(hou),使用TBST漂洗轉印膜3次,每次5分鐘(zhong);
3. 將轉印(yin)膜(mo)放(fang)入到雜交孵育盒中,加入10-20 ml快速封閉液完全覆蓋轉印(yin)膜(mo),置于(yu)搖床輕輕搖動(dong),參考下表確定封閉時(shi)間:
膜類型
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推薦封閉時間
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反應溫度
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PVDF膜
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5-10分(fen)鐘
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常溫 25度
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NC膜
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10-20 分鐘
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常(chang)溫(wen)25度
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注(zhu)意:使用本(ben)產(chan)品,PVDF膜和(he)NC膜使用推(tui)薦(jian)封閉時間(jian),經多種抗(kang)體(ti)的(de)(de)測(ce)試封閉效(xiao)果顯著優于常(chang)規的(de)(de)BSA封閉1 h。對(dui)于一些背景非常(chang)高的(de)(de)抗(kang)體(ti),可以嘗試延長封閉時間(jian)。如(ru)有特(te)殊需(xu)要(yao),也可4℃封閉過夜。
4. 封閉結束后棄去封閉液,進行Western Blot后續操作。