BN電泳介紹及參考文獻
溫和(he)膠，簡寫(xie)為BN-PAGE（Blue Native PAGE），由(you)Sch?gger等建立的一種(zhong)電泳系統，最初(chu)被(bei)用來(lai)分(fen)離牛心臟組織中線(xian)粒(li)體上的蛋白質(zhi)復合體。由于在研究蛋白復合體上的優勢，BN-PAGE被用于線(xian)粒體(ti)(ti)膜、類(lei)(lei)囊體(ti)(ti)膜、質膜等(deng)膜蛋白復(fu)合體(ti)(ti)的(de)研究(jiu)。在做植物類(lei)(lei)囊體(ti)(ti)膜的(de)電泳(yong)時(shi)，結合葉綠(lv)(lv)素的(de)蛋白質復(fu)合物呈(cheng)綠(lv)(lv)色，而不(bu)含葉綠(lv)(lv)素的(de)呈(cheng)藍色，因此又(you)稱(cheng)之為藍綠(lv)(lv)溫和膠(jiao)電泳(yong)。
Blue Native PAGE是最古老的(de)Native-PAGE技術。在電泳(yong)緩(huan)沖液(ye)和上樣緩(huan)沖液(ye)中加入了考馬斯亮藍G-250，蛋(dan)白質表面結合了大量的考(kao)馬斯亮藍染料而(er)帶上負(fu)電荷，這會導致即使堿性蛋(dan)白（pI高于7的蛋白）也會向(xiang)陰極(ji)遷移。
Blue Native PAGE在(zai)分析(xi)蛋(dan)白質(zhi)-蛋白質相互(hu)作用以及(ji)膜蛋白復合物方面有很(hen)大的優勢(shi)，其分(fen)離(li)范(fan)圍(wei)在100KDa-10MDa。這(zhe)種(zhong)方法的缺(que)點是：考馬(ma)斯亮藍與蛋白的結合起到了去(qu)垢劑(ji)的作用(yong)，可能導(dao)致(zhi)復合物的分離；并對化學(xue)發光(guang)(guang)或(huo)蛋白質輔基的熒光(guang)(guang)或(huo)熒光(guang)(guang)染料(liao)的標記具有潛在的猝滅作用(yong)。
Clear Native PAGE是(shi)另(ling)外(wai)一種電泳(yong)技術，這是(shi)BN-PAGE之(zhi)后出現(xian)的一種(zhong)技術(shu)。可以分離聚丙烯酰胺凝膠（PI小于7）中的酸性水溶性蛋(dan)白和膜蛋(dan)白。分(fen)辨率通常低(di)于BN-PAGE。但(dan)是，當考馬斯亮藍G-250染(ran)料(liao)妨礙進一步(bu)分析時，CN-PAGE具有優勢(shi)。例如，為了測量催(cui)化(hua)活(huo)性（例如線粒(li)體ATP合酶）或(huo)分離痕(hen)量的(de)膜蛋白以(yi)進行熒光共振能(neng)量分析，CN-PAGE比BN-PAGE更溫(wen)和。 CN-PAGE可以維持膜(mo)蛋(dan)白(bai)的超分子(zi)組裝(zhuang)，而(er)BN-PAGE的結構會引起分(fen)解。可以通過CN-PAGE檢測線粒體ATPase中具有酶促活(huo)性的(de)寡聚體，但使用BN-PAGE則不能檢(jian)測。由于CN-PAGE中沒有(you)帶(dai)電的(de)染料，因此蛋白質在電場中的(de)遷移完全取(qu)決于(yu)蛋白質的(de)固有(you)電荷，等電點低于(yu)7的酸性蛋白才能帶上負(fu)電(dian)荷正常電(dian)泳。優(you)點是(shi)條件相對溫和，在蛋白質組學研究中具有(you)很大的優(you)勢。 BN-PAGE和CN-PAGE的制膠(jiao)緩沖液與電(dian)泳條件相(xiang)同，但是(shi)CN-PAGE的陰極(ji)緩沖液(ye)（內槽緩沖液(ye)）不含(han)考馬斯染料，但將0.025％的洋地黃皂苷添(tian)加(jia)到了凝膠(jiao)中(zhong)。
BN電泳參考文獻
1 Blue native PAGE
Hermann Schagger在(zai)Nature Protocol上的經典方(fang)法(fa)。凝膠緩沖液使用咪唑配方(fang)。
2 Blue Native electrophoresis to study mitochondrial and other protein complexes
凝(ning)膠(jiao)緩沖液使(shi)用(yong)Bis-Tris配方。
相關(guan)產品：RTD6139-0312 Blue/Clear 非變性凝膠電泳試劑(ji)盒(he)(U型板(ban)3-12%預制膠，通用型)
RTD6139-0420 Blue/Clear 非變性(xing)凝膠電泳試劑盒(he)(U型板4-16%預(yu)制膠，通用型)
3 Advantages and limitations of clear-native PAGE
Hermann Schagger CN-PAGE的優缺點
4 BN系統非(fei)梯度凝膠(jiao)（手灌膠(jiao)） Non-Gradient Blue Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis
相關產品：RTD6140 Blue/Clear 非(fei)變性凝膠電泳(yong)試(shi)劑盒(手灌膠)
5 BN系統分離動物線粒體復合物 Blue-Native Electrophoresis to Study the OXPHOS Complexes
6 BN系統分離類囊體復合物 Optimized native gel systems for separation of thylakoid protein complexes:novel super- and mega-complexes
BN電泳(yong)過程中電泳(yong)報錯問(wen)題：
BN電(dian)泳在更換為無色電(dian)泳緩(huan)沖(chong)液后，電(dian)流基本在2-5mA，有(you)些(xie)電(dian)泳電(dian)源(yuan)(yuan)如伯樂電(dian)源(yuan)(yuan)有(you)負載檢查功能，電(dian)流過低（低于4mA） 會認為沒有(you)負載，報錯E1錯誤(wu)代碼，終止電(dian)泳。解(jie)決方法(fa)是更換電(dian)泳電(dian)源(yuan)(yuan)，如使(shi)(shi)用國(guo)產(chan)電(dian)源(yuan)(yuan)；另外(wai)可(ke)以調高電(dian)壓高于300V，使(shi)(shi)得電(dian)流不要低于4mA。
