RealECL發光液 Ver.740574
● 產品組成：
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貨號
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名稱
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規格
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保存條件
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EC2520-01
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RealECL發光(guang)液(ye)
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25 ml
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2-8℃
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EC2520-02
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RealECL發光液
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100 ml
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2-8℃
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EC2520-03
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RealECL發光液
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500 ml
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2-8℃
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說明書
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一份
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● 產品簡介：
RealECL 是一種(zhong)超敏(min)ECL化(hua)學發(fa)光試劑(ji)盒，可(ke)(ke)與二(er)(er)抗上(shang)耦連(lian)的辣根(gen)過氧(yang)化(hua)物酶（HRP）發(fa)生化(hua)學反應，發(fa)出熒光，從而可(ke)(ke)以(yi)(yi)通過用(yong)X光片壓片或其它適當熒光成像設(she)備檢測樣品。RealECL具有極高靈敏(min)度和(he)高信(xin)噪比，可(ke)(ke)檢測出10-100 fg的微量(liang)(liang)抗原；發(fa)光迅速，熒光可(ke)(ke)使X感光膠片感光達1小時以(yi)(yi)上(shang)，特別適用(yong)于痕量(liang)(liang)蛋白檢測；另(ling)外高靈敏(min)度可(ke)(ke)以(yi)(yi)大大節省寶貴的樣品以(yi)(yi)及非常昂(ang)貴的一抗和(he)二(er)(er)抗的用(yong)量(liang)(liang)，降(jiang)低實(shi)驗成本。
● 貯存、運輸及效期：
2-8℃貯存；有效期一年；濕冰運輸。
● 注意事項：
1. RealECL A液(ye)和B液(ye)在吸取(qu)過程(cheng)中(zhong)必須要(yao)更(geng)換槍頭，A液(ye)和B液(ye)相互污染后會導致A液(ye)或B液(ye)逐漸失效，影響后續(xu)的(de)使用效果(guo)。
2. 各溶液使(shi)用后，請蓋緊瓶蓋，以防失(shi)效。
3. 為(wei)獲得最佳實驗結果，請務(wu)必優化實驗條件，包括檢測樣品(pin)的用(yong)量、一抗、二抗稀釋(shi)度、雜交膜及(ji)封閉試劑的選擇(ze)。
4. 由于疊氮(dan)鈉(na)(na)是HRP抑制劑，在緩(huan)沖液中應避免(mian)使用疊氮(dan)鈉(na)(na)作為防腐劑；如果二(er)抗中含有疊氮(dan)鈉(na)(na)，發光實驗前要進(jin)行5次TBST或PBST漂洗，每次10分(fen)鐘(zhong)。
5. 在與膜發生接觸過程(cheng)中，請佩戴手套且使用干(gan)凈鑷子等潔凈器材，避免(mian)蛋白污(wu)染產生高(gao)背景。
● 使用說明：
1. RealECL工(gong)(gong)作液(ye)的配制：等體積混合(he)適量RealECL A液(ye)和B液(ye)，常(chang)溫放置備(bei)用。工(gong)(gong)作液(ye)宜在臨檢測(ce)前配制。
2. Western二(er)抗孵育后，進行數(shu)次洗(xi)滌，用(yong)平(ping)頭塑料鑷子將膜取出，用(yong)濾紙略吸去過(guo)多的液體(ti)(切(qie)勿接(jie)觸膜的蛋(dan)白面)，但不要使(shi)膜過(guo)度干燥，然后將膜平(ping)鋪于(yu)一潔凈保鮮膜上，避(bi)免產(chan)生氣(qi)泡。
注：某些(xie)市(shi)售保鮮膜包裹印跡膜時會淬滅熒(ying)光，請選擇ECL專(zhuan)用(yong)保鮮膜獲得(de)更好的實驗(yan)效果。
3. 根據膜的大小，按每平方厘米膜加0.125 ml RealECL工作液的比例，滴加RealECL工作液到膜上，確保使工作液均勻覆蓋在膜上，常溫放置1-2分鐘。
注：為達節約目(mu)的可將膜(mo)減小但(dan)勿降低發(fa)光(guang)液用量，確保發(fa)光(guang)液完全覆蓋于膜(mo)上。
4.將保鮮膜(mo)折起來完全包(bao)裹雜交膜(mo)，去(qu)除(chu)氣泡和皺褶(zhe)，可(ke)剪去(qu)邊緣(yuan)部多(duo)余(yu)的(de)保鮮膜(mo)。用濾紙吸去(qu)多(duo)余(yu)的(de)發光工作液。
5.可以使用ECL發光檢測儀器或暗室曝光。用膠帶將覆蓋雜交膜的保鮮膜固定在暗盒內，在黑暗中放入X感光膠片，分別曝光不同的時間如數秒到數分鐘，顯影定影觀察沖洗結果。如掌握不好曝光時間，可以在膜上放置3-4張X感光膠片，統一曝光3-5分鐘，顯影后選擇一張曝光最好的膠片。
應用示例：
綠蘿總蛋(dan)白，RbcL一(yi)抗 1：2000，羊抗兔IgG-HRP 1：2000
a PVDF膜用抗體清除液處理后再用RealECL曝光。