RealECL發(fa)光(guang)液 Ver.740574
● 產品組成(cheng)：
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貨號
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名稱
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規格
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保(bao)存(cun)條件(jian)
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EC2520-01
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RealECL發光液(ye)
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25 ml
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2-8℃
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EC2520-02
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RealECL發(fa)光液
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100 ml
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2-8℃
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EC2520-03
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RealECL發光(guang)液
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500 ml
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2-8℃
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說明書(shu)
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一份
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● 產(chan)品簡介：
RealECL 是(shi)一種超(chao)敏(min)ECL化(hua)學發(fa)(fa)光試劑盒，可(ke)與二(er)抗(kang)上耦連的(de)辣(la)根過(guo)氧(yang)化(hua)物酶（HRP）發(fa)(fa)生化(hua)學反應，發(fa)(fa)出熒光，從而(er)可(ke)以通過(guo)用(yong)X光片壓片或其它適(shi)當熒光成像設備檢測(ce)(ce)樣品。RealECL具有極高(gao)靈敏(min)度(du)和高(gao)信噪(zao)比，可(ke)檢測(ce)(ce)出10-100 fg的(de)微量(liang)抗(kang)原；發(fa)(fa)光迅速(su)，熒光可(ke)使X感光膠(jiao)片感光達1小時以上，特別適(shi)用(yong)于痕量(liang)蛋白檢測(ce)(ce)；另外(wai)高(gao)靈敏(min)度(du)可(ke)以大大節(jie)省寶貴(gui)的(de)樣品以及非(fei)常昂貴(gui)的(de)一抗(kang)和二(er)抗(kang)的(de)用(yong)量(liang)，降低(di)實驗(yan)成本(ben)。
● 貯存、運輸及效期：
2-8℃貯存(cun)；有效期一年；濕冰運輸。
● 注意事項：
1. RealECL A液(ye)和B液(ye)在吸取過程中(zhong)必須要(yao)更(geng)換槍頭，A液(ye)和B液(ye)相互污染后會導致A液(ye)或B液(ye)逐漸失(shi)效，影響后續的(de)使用效果。
2. 各溶液(ye)使用后，請(qing)蓋(gai)(gai)緊瓶(ping)蓋(gai)(gai)，以防失效。
3. 為(wei)獲(huo)得最(zui)佳實(shi)驗結果，請務必優化實(shi)驗條件，包(bao)括檢(jian)測(ce)樣品的用量、一抗、二(er)抗稀(xi)釋度、雜交膜及(ji)封閉試(shi)劑的選(xuan)擇(ze)。
4. 由于疊(die)氮鈉(na)是HRP抑制劑，在緩沖液中(zhong)應避免使用疊(die)氮鈉(na)作(zuo)為防腐(fu)劑；如果(guo)二(er)抗中(zhong)含有疊(die)氮鈉(na)，發(fa)光實驗前要進(jin)行5次TBST或PBST漂洗，每次10分鐘(zhong)。
5. 在(zai)與膜發(fa)生接(jie)觸過(guo)程中，請佩戴手套(tao)且使用干(gan)凈(jing)鑷子等(deng)潔(jie)凈(jing)器材，避免(mian)蛋白污染產生高背景(jing)。
● 使用說明：
1. RealECL工作液(ye)(ye)的配制：等體(ti)積混合(he)適量RealECL A液(ye)(ye)和B液(ye)(ye)，常溫放置備(bei)用。工作液(ye)(ye)宜在臨檢測前配制。
2. Western二抗(kang)孵育后，進行數次洗(xi)滌，用平頭塑料鑷子將膜(mo)取出，用濾紙略吸去過(guo)多(duo)的液體(切(qie)勿接(jie)觸膜(mo)的蛋白面(mian))，但(dan)不(bu)要使(shi)膜(mo)過(guo)度干(gan)燥(zao)，然(ran)后將膜(mo)平鋪于一潔凈保鮮膜(mo)上，避免產生氣(qi)泡。
注：某(mou)些(xie)市售保(bao)鮮膜(mo)包裹印跡膜(mo)時(shi)會淬滅熒光(guang)，請選擇ECL專(zhuan)用保(bao)鮮膜(mo)獲得更好的實驗效果。
3. 根據膜(mo)的大(da)小，按每平(ping)方厘米膜(mo)加(jia)(jia)0.125 ml RealECL工(gong)(gong)作(zuo)液(ye)的比(bi)例，滴(di)加(jia)(jia)RealECL工(gong)(gong)作(zuo)液(ye)到膜(mo)上(shang)，確保使工(gong)(gong)作(zuo)液(ye)均勻覆蓋在膜(mo)上(shang)，常(chang)溫放置1-2分(fen)鐘。
注：為達節(jie)約(yue)目的可將膜減小但勿降低發光液(ye)用量，確保發光液(ye)完全覆蓋于(yu)膜上。
4.將保鮮(xian)膜折起來完全包(bao)裹雜交膜，去(qu)除氣泡和皺褶，可剪(jian)去(qu)邊緣部多余(yu)的(de)保鮮(xian)膜。用濾(lv)紙吸去(qu)多余(yu)的(de)發光工作液。
5.可(ke)以(yi)使用ECL發光(guang)檢測儀器或(huo)暗室曝光(guang)。用膠(jiao)帶(dai)將覆(fu)蓋(gai)雜交膜(mo)(mo)的(de)保鮮膜(mo)(mo)固定(ding)在(zai)暗盒內，在(zai)黑暗中(zhong)放入X感光(guang)膠(jiao)片(pian)，分別(bie)曝光(guang)不同(tong)的(de)時間如數(shu)秒到(dao)數(shu)分鐘(zhong)，顯影定(ding)影觀察沖洗(xi)結果(guo)。如掌握不好曝光(guang)時間，可(ke)以(yi)在(zai)膜(mo)(mo)上放置3-4張X感光(guang)膠(jiao)片(pian)，統(tong)一(yi)曝光(guang)3-5分鐘(zhong)，顯影后選(xuan)擇一(yi)張曝光(guang)最好的(de)膠(jiao)片(pian)。
應(ying)用示例：
綠蘿總蛋(dan)白，RbcL一抗 1：2000，羊抗兔IgG-HRP 1：2000
a PVDF膜用(yong)抗體清除(chu)液處理后(hou)再(zai)用(yong)RealECL曝光。