RealECL發光液 Ver.740574
● 產品組成：
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貨號
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名(ming)稱
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規格(ge)
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保存條件
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EC2520-01
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RealECL發光液(ye)
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25 ml
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2-8℃
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EC2520-02
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RealECL發(fa)光(guang)液
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100 ml
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2-8℃
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EC2520-03
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RealECL發光液
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500 ml
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2-8℃
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說明書
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一份(fen)
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● 產品簡介：
RealECL 是一種超(chao)敏(min)ECL化學發(fa)光(guang)試劑(ji)盒(he)，可與二(er)抗(kang)(kang)上耦連(lian)的(de)辣(la)根(gen)過氧化物酶(mei)（HRP）發(fa)生化學反應，發(fa)出熒光(guang)，從(cong)而(er)可以(yi)通過用X光(guang)片壓片或其它適當熒光(guang)成像設備檢(jian)測樣(yang)品。RealECL具(ju)有極高靈敏(min)度和高信(xin)噪比，可檢(jian)測出10-100 fg的(de)微量抗(kang)(kang)原；發(fa)光(guang)迅速，熒光(guang)可使X感光(guang)膠片感光(guang)達1小(xiao)時以(yi)上，特別適用于痕量蛋白檢(jian)測；另(ling)外高靈敏(min)度可以(yi)大大節(jie)省寶貴(gui)的(de)樣(yang)品以(yi)及非常昂(ang)貴(gui)的(de)一抗(kang)(kang)和二(er)抗(kang)(kang)的(de)用量，降低實驗成本。
● 貯存、運輸及效期：
2-8℃貯存；有效期一(yi)年；濕冰運輸。
● 注意事項：
1. RealECL A液和(he)B液在吸取過程(cheng)中必須要更換槍頭，A液和(he)B液相互(hu)污染后(hou)會導致A液或B液逐漸失效，影響后(hou)續的使用效果(guo)。
2. 各溶(rong)液使用后，請蓋(gai)緊(jin)瓶蓋(gai)，以防失效。
3. 為獲得最佳實驗(yan)結果，請務必優化實驗(yan)條件(jian)，包括檢測樣品(pin)的(de)用量、一抗(kang)、二抗(kang)稀釋度、雜交膜(mo)及封閉試劑的(de)選擇(ze)。
4. 由于疊氮(dan)鈉是(shi)HRP抑制劑，在(zai)緩沖液中應避免使用疊氮(dan)鈉作為(wei)防腐劑；如果二抗(kang)中含(han)有疊氮(dan)鈉，發光實驗(yan)前要進行5次(ci)TBST或PBST漂(piao)洗，每次(ci)10分(fen)鐘。
5. 在(zai)與膜發生(sheng)接觸(chu)過程中，請佩戴手(shou)套(tao)且使用干凈鑷子(zi)等潔凈器材，避(bi)免蛋白(bai)污染(ran)產生(sheng)高背景(jing)。
● 使用說明：
1. RealECL工作液的配制(zhi)：等體積混合適量RealECL A液和B液，常溫放置備(bei)用。工作液宜(yi)在臨檢測前配制(zhi)。
2. Western二抗(kang)孵育后(hou)，進行數次洗滌，用(yong)平(ping)頭塑料鑷子將(jiang)膜取出，用(yong)濾紙略吸(xi)去過(guo)多(duo)的液體(切(qie)勿接(jie)觸膜的蛋(dan)白面)，但不(bu)要使(shi)膜過(guo)度干(gan)燥，然后(hou)將(jiang)膜平(ping)鋪于一潔凈保鮮膜上，避免(mian)產生氣(qi)泡。
注：某些市售保鮮膜包(bao)裹印跡膜時(shi)會淬滅熒(ying)光(guang)，請選(xuan)擇ECL專(zhuan)用保鮮膜獲(huo)得更好的(de)實驗效果(guo)。
3. 根據(ju)膜(mo)的大小，按每平(ping)方(fang)厘米膜(mo)加0.125 ml RealECL工作(zuo)液的比例，滴加RealECL工作(zuo)液到(dao)膜(mo)上，確(que)保使工作(zuo)液均勻覆蓋(gai)在膜(mo)上，常溫放置1-2分鐘(zhong)。
注：為(wei)達節(jie)約目的(de)可將膜減(jian)小但勿降低發光液用(yong)量，確保發光液完全覆(fu)蓋于膜上。
4.將保鮮膜折(zhe)起來完全包裹(guo)雜交膜，去(qu)除氣(qi)泡(pao)和皺褶(zhe)，可剪(jian)去(qu)邊緣部多(duo)(duo)余的保鮮膜。用濾(lv)紙吸去(qu)多(duo)(duo)余的發(fa)光(guang)工作(zuo)液(ye)。
5.可以使用ECL發光檢測儀器或暗室曝光。用膠帶將覆蓋雜交膜的保鮮膜固定在暗盒內，在黑暗中放入X感光膠片，分別曝光不同的時間如數秒到數分鐘，顯影定影觀察沖洗結果。如掌握不好曝光時間，可以在膜上放置3-4張X感光膠片，統一曝光3-5分鐘，顯影后選擇一張曝光最好的膠片。
應用示例：
綠蘿(luo)總(zong)蛋白，RbcL一抗(kang) 1：2000，羊抗(kang)兔(tu)IgG-HRP 1：2000
a PVDF膜用(yong)抗體清除液處理后再用(yong)RealECL曝光。