RealPAGE TBE-PAGE核酸非變性電泳預制膠
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名稱
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規(gui)格
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RealPAGE
TBE-PAGE核酸非變(bian)性電(dian)泳預制膠（12孔）
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10板/盒
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● 產品介紹：
RealPAGE TBE-PAGE核(he)酸非變性電泳(yong)預(yu)制膠(jiao)適用于20-2,000 bp雙鏈(lian)DNA或20-2,000
nt單鏈(lian)DNA的(de)核(he)酸電泳(yong)，適合用于 DNA電泳(yong)應用領域(yu)，包括分(fen)析限制性酶(mei)切(qie)、PCR產物、DNA印跡(ji)分(fen)析和引物分(fen)析。是一(yi)款安全、快捷、高性能的(de)預(yu)制凝膠(jiao)，即(ji)開(kai)即(ji)用無(wu)需(xu)自行配置各種試劑及灌膠(jiao)操作，核(he)酸條(tiao)帶均一(yi)性好，分(fen)辨率高。兼容市(shi)場上主流的(de) mini 電泳(yong)槽， 如
Bio-Rad，天能，六一(yi)和君意東方等。
產品參數：
預制(zhi)膠板尺寸(cun)：長10 cm，寬(kuan)8.2 cm，厚度(du)為(wei)4 mm
預制膠(jiao)尺寸：長(chang) 8.2 cm，寬(kuan)
7.2 cm，厚度為1.1 mm
梳孔：12 孔
包裝規格(ge)：10板/盒(he)
最(zui)大上樣量：30 μl（12 孔(kong)）
● 產品貨號及選擇：
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貨(huo)號
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分離膠濃度
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孔數
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最大上樣量(liang)
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電泳緩沖液(ye)
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最佳分離范圍
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溴酚藍(lan)位置
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RTH5101-0005
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5%
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12
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30 μl
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1×TBE
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200-2000 bp
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~70 nt
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RTH5101-0010
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10%
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12
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30 μl
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1×TBE
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50-1500 bp
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~35 nt
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RTH5101-0015
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15%
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12
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30 μl
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1×TBE
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20-1000 bp
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~20 nt
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● 貯存、效期及運輸：
預制膠4-8℃貯存，切勿置于0oC以下冷凍；有(you)效期30天；常溫運輸。
● 使用說明：
一. 樣品準備：
1.1 DNA樣(yang)品(pin)按照5：1體積(ji)加入6×非變性PAGE DNA上(shang)樣(yang)緩沖液（貨(huo)號：DL070），混勻后上(shang)樣(yang)。 建議每孔上(shang)樣(yang)0.2-0.5
μg左(zuo)右(you)即(ji)可(ke)。
1.2 TBE- PAGE非變(bian)性(xing)電泳雙鏈(lian)DNA Marker可以選擇10 bp DNA ladder（10-100 bp）（貨號(hao)：RTM443）或(huo)20 bp DNA ladder（20-500 bp）（貨號(hao)：RTM441）或(huo)25 bp DNA ladder（25-500bp）（貨號(hao)：RTM444）作為分子量標準；單(dan)鏈(lian)DNA Marker可以選擇單(dan)鏈(lian)DNA
Marker（20-75 nt）非預混(hun)型(xing)（貨號(hao)：RTM507）或(huo)單(dan)鏈(lian)DNA Marker（10-75 nt）非預混(hun)型(xing)（貨號(hao)：RTM509）。
二. 電泳液的準備：
取 5×TBE（貨號：TB001），加入去離子水稀釋為1×，制備成 1×TBE buffer或自行配制1×TBE。1×TBE電泳緩沖液配制方法：
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終濃(nong)度(du)
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順序
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原料(liao)
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1升
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5 升
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89 mM
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1
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Tris堿 [MW121.14]
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10.8 克
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54克
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2 mM
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2
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EDTA 2Na·2H2O [MW372.24]
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0.744 克
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3.72克
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89 MM
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3
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硼酸 [MW61.83]
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5.5 克
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27.5克
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4
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超純(chun)水最后定容至
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1 升
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5 升(sheng)
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最后pH在8.2-8.3之(zhi)間，可以不用調節pH，記錄每批pH
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三. 電泳：
3.1 將(jiang)預制(zhi)膠從(cong)包裝袋中取出(chu)，裝入(ru)兼容的電(dian)泳槽中，加入(ru)電(dian)泳緩沖(chong)液，再緩慢地將(jiang)梳子拔出(chu)。
注：伯樂Mini III或(huo)Mini-PROTEAN Tetra Cell，天能VE-180，六一24K系(xi)列電泳槽請(qing)確保密封(feng)條的安裝方(fang)向（如(ru)圖）。六一其他系(xi)列，君意東方(fang)JY-SCZ2/4，百晶BG-verMINI，Hoefer
Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280)等電泳槽可以直接使(shi)用預制膠(jiao)。不兼容Thermol系(xi)列電泳槽。
3.2內槽加滿電泳液，外槽加入電泳液沒過電泳槽底部的陽極即可，用1×TBE緩沖液徹底沖洗加樣孔2-3次。
3.3 上樣：在梳孔內加入(ru)適(shi)當濃度和體積的樣品。建議每孔上樣0.2-0.5 μg左(zuo)右即可。
注：最佳上樣(yang)量須通(tong)過(guo)實驗來確定，樣(yang)品過(guo)量較易導(dao)致(zhi)條帶拖尾。
3.4 將電(dian)泳(yong)槽(cao)蓋(gai)(gai)子蓋(gai)(gai)好，并(bing)將電(dian)源線插頭插入(ru)電(dian)泳(yong)儀電(dian)源插孔(紅對紅，黑(hei)對黑(hei))。一般在150V電(dian)壓(ya)，電(dian)泳(yong)50-90分(fen)鐘(zhong)，根據溴酚(fen)藍的(de)位置大體判(pan)斷條(tiao)帶大小位置，停(ting)止電(dian)泳(yong)。
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恒電壓
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起始電流
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結(jie)束電(dian)流
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電泳(yong)時間
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適用條件
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推薦電壓
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150V
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15-20 mA/板膠
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5-10 mA/板膠
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60+ min
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最(zui)佳(jia)電(dian)壓，最(zui)優的分辨(bian)率(lv)
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非(fei)變性膠(jiao)濃度(du)
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溴酚藍
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二甲苯菁(jing)
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5%
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~70 nt
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~250 nt
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10%
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~35 nt
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~120 nt
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15%
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~20 nt
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~75 nt
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3.5 取出玻(bo)璃(li)膠(jiao)板，稍(shao)加(jia)用力慢(man)慢(man)扳開或(huo)用刮板輕(qing)輕(qing)撬開玻(bo)璃(li)膠(jiao)板，將(jiang)凝膠(jiao)取出。
四. 染色：
使用核酸(suan)染料染色，RealSafe Red（貨號(hao)：GR002）或RealSafe All（貨號(hao)：GR004）核酸(suan)染料結(jie)合核酸(suan)效果(guo)(guo)最(zui)佳，強烈建議使用以便獲(huo)得最(zui)佳效果(guo)(guo)的膠(jiao)圖(tu)。
以下程序用RealSafe Red核酸(suan)染(ran)料(貨號(hao):GR002)進行染(ran)色。
4.1
漂(piao)(piao)洗(xi)(xi)：拆下凝(ning)膠后(hou)，適量蒸(zheng)餾水(shui)漂(piao)(piao)洗(xi)(xi)3-5分鐘。
4.2
染(ran)色液配制：
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即用型RealSafe Red核(he)酸染色(se)液(ye)配制
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1×TBE
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RealSafe Red核(he)酸染料
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10-20 μl
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4.3 染色(se)：
凝膠(jiao)浸泡于即用型染(ran)色(se)液(ye)中，常溫避光搖床40-60 rpm 染(ran)色(se)30 分鐘。
4.4 觀察(cha)：
紫外(wai)燈(deng)或藍光儀上觀(guan)察(cha)條帶。
● 實驗示例：
