RealPAGE TBE-PAGE核酸非變性電泳預制膠
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名(ming)稱
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規格
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RealPAGE TBE-PAGE核酸非變性電泳預(yu)制膠（12孔）
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10板(ban)/盒
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● 產品介紹：
RealPAGE TBE-PAGE核酸非(fei)變性(xing)(xing)電泳(yong)預制(zhi)膠(jiao)適(shi)用(yong)(yong)于20-2,000 bp雙鏈(lian)DNA或20-2,000 nt單鏈(lian)DNA的(de)核酸電泳(yong)，適(shi)合用(yong)(yong)于 DNA電泳(yong)應用(yong)(yong)領域，包括分(fen)析限制(zhi)性(xing)(xing)酶切、PCR產物、DNA印(yin)跡分(fen)析和(he)引物分(fen)析。是一(yi)款安(an)全、快捷、高性(xing)(xing)能的(de)預制(zhi)凝膠(jiao)，即(ji)開(kai)即(ji)用(yong)(yong)無需(xu)自行配(pei)置(zhi)各種試(shi)劑及灌(guan)膠(jiao)操(cao)作，核酸條帶均(jun)一(yi)性(xing)(xing)好，分(fen)辨率高。兼(jian)容市場上(shang)主流的(de) mini 電泳(yong)槽， 如 Bio-Rad，天能，六一(yi)和(he)君(jun)意東(dong)方等(deng)。
產(chan)品參數(shu)：
預制膠板(ban)尺寸：長10 cm，寬(kuan)8.2 cm，厚度為4 mm
預制膠尺寸(cun)：長(chang) 8.2 cm，寬 7.2 cm，厚度(du)為1.1 mm
梳孔：12 孔
包裝規格：10板/盒(he)
最大(da)上樣量：30 μl（12 孔）
● 產品貨號及選擇：
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貨號
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分離膠濃(nong)度
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孔數
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最大上樣(yang)量
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電(dian)泳緩沖液(ye)
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最佳(jia)分(fen)離范圍
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溴酚藍位置
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RTH5101-0005
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5%
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12
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30 μl
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1×TBE
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200-2000 bp
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~70 nt
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RTH5101-0010
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10%
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12
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30 μl
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1×TBE
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50-1500 bp
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~35 nt
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RTH5101-0015
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15%
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12
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30 μl
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1×TBE
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20-1000 bp
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~20 nt
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● 貯存、效期及運輸：
預制膠4-8℃貯存，切勿置于0oC以下冷凍；有效期30天；常溫(wen)運輸。
● 使用說明：
一. 樣品準備：
1.1 DNA樣(yang)(yang)品按(an)照5：1體積加入6×非變(bian)性PAGE DNA上樣(yang)(yang)緩沖液（貨號(hao)：DL070），混勻后上樣(yang)(yang)。 建議每孔上樣(yang)(yang)0.2-0.5 μg左(zuo)右(you)即可。
1.2 TBE- PAGE非(fei)(fei)變(bian)性電泳雙(shuang)鏈(lian)DNA Marker可以選擇10 bp DNA ladder（10-100 bp）（貨(huo)號(hao)：RTM443）或(huo)(huo)20 bp DNA ladder（20-500 bp）（貨(huo)號(hao)：RTM441）或(huo)(huo)25 bp DNA ladder（25-500bp）（貨(huo)號(hao)：RTM444）作為分子量標(biao)準；單(dan)鏈(lian)DNA Marker可以選擇單(dan)鏈(lian)DNA Marker（20-75 nt）非(fei)(fei)預(yu)混(hun)型(xing)（貨(huo)號(hao)：RTM507）或(huo)(huo)單(dan)鏈(lian)DNA Marker（10-75 nt）非(fei)(fei)預(yu)混(hun)型(xing)（貨(huo)號(hao)：RTM509）。
二. 電泳液的準備：
取 5×TBE（貨號：TB001），加入去離子(zi)水稀釋為1×，制備(bei)成1×TBE buffer或自行配(pei)制1×TBE。1×TBE電泳緩沖液配(pei)制方法：
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終濃(nong)度
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順序
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原料
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1升
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5 升
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89 mM
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1
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Tris堿 [MW121.14]
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10.8 克
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54克
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2 mM
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2
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EDTA 2Na·2H2O [MW372.24]
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0.744 克
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3.72克
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89 MM
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3
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硼酸 [MW61.83]
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5.5 克
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27.5克
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4
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超純水最后定(ding)容至(zhi)
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1 升
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5 升
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最(zui)后pH在(zai)8.2-8.3之間，可以不用調節pH，記(ji)錄每批pH
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三. 電泳：
3.1 將預制膠(jiao)從(cong)包裝袋(dai)中取出(chu)，裝入兼容的電泳(yong)槽中，加入電泳(yong)緩(huan)沖液，再緩(huan)慢地(di)將梳子(zi)拔(ba)出(chu)。
注(zhu)：伯樂Mini III或Mini-PROTEAN Tetra Cell，天能VE-180，六一24K系列(lie)電泳槽(cao)請確保密封(feng)條的安(an)裝方向(xiang)（如圖）。六一其(qi)他系列(lie)，君(jun)意東(dong)方JY-SCZ2/4，百(bai)晶BG-verMINI，Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280)等電泳槽(cao)可以(yi)直接使用預制膠。不(bu)兼容(rong)Thermol系列(lie)電泳槽(cao)。
3.2內槽加滿電泳液，外槽加入電泳液沒過電泳槽底部的陽極即可，用1×TBE緩沖液徹底沖洗加樣孔2-3次。
3.3 上(shang)樣：在梳孔內加入(ru)適當濃度和體積的樣品。建議每孔上(shang)樣0.2-0.5 μg左右即可(ke)。
注：最佳上樣(yang)(yang)量須通(tong)過(guo)實驗來確(que)定，樣(yang)(yang)品過(guo)量較易導致條帶拖(tuo)尾(wei)。
3.4 將電(dian)(dian)(dian)泳(yong)(yong)(yong)槽蓋(gai)(gai)子蓋(gai)(gai)好(hao)，并將電(dian)(dian)(dian)源線插頭插入電(dian)(dian)(dian)泳(yong)(yong)(yong)儀電(dian)(dian)(dian)源插孔(紅對紅，黑對黑)。一般在150V電(dian)(dian)(dian)壓，電(dian)(dian)(dian)泳(yong)(yong)(yong)50-90分(fen)鐘，根據(ju)溴酚藍的位(wei)置大(da)體判斷條帶大(da)小位(wei)置，停止電(dian)(dian)(dian)泳(yong)(yong)(yong)。
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恒(heng)電壓(ya)
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起始電流(liu)
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結束電(dian)流
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電泳時間
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適用條件
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推(tui)薦電壓
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150V
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15-20 mA/板膠
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5-10 mA/板膠
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60+ min
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最(zui)佳電壓，最(zui)優(you)的分辨(bian)率
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非變性膠濃度
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溴酚藍(lan)
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二甲苯菁
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5%
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~70 nt
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~250 nt
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10%
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~35 nt
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~120 nt
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15%
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~20 nt
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~75 nt
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3.5 取出玻璃膠(jiao)板，稍加用(yong)力慢慢扳開(kai)或用(yong)刮板輕輕撬開(kai)玻璃膠(jiao)板，將凝膠(jiao)取出。
四. 染色：
使用核(he)酸染(ran)料染(ran)色，RealSafe Red（貨號：GR002）或RealSafe All（貨號：GR004）核(he)酸染(ran)料結合(he)核(he)酸效果(guo)最佳(jia)(jia)，強烈建(jian)議使用以(yi)便獲(huo)得最佳(jia)(jia)效果(guo)的膠圖。
以下程序用RealSafe Red核酸染料(liao)(貨號:GR002)進行染色。
4.1 漂洗：拆下凝(ning)膠(jiao)后(hou)，適量蒸餾(liu)水漂洗3-5分鐘。
4.2 染色液配制：
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即用型RealSafe Red核(he)酸染色液配制
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1×TBE
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RealSafe Red核酸染料(liao)
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10-20 μl
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4.3 染(ran)色：
凝膠浸泡于(yu)即用型染色(se)液中，常(chang)溫避光(guang)搖床40-60 rpm 染色(se)30 分鐘。
4.4 觀察：
紫外燈或藍(lan)光儀上觀察條帶。
● 實驗示例：
