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10% RealPAGE TBE-尿(niao)素-PAGE核酸變性(xing)電泳(yong)預(yu)制膠

● 產(chan)品介紹：

RealPAGE TBE-尿素-PAGE核(he)(he)(he)酸變性電泳預制(zhi)膠適(shi)用(yong)于 10-1000 個堿基長度的(de)單鏈 DNA或 RNA的(de)分(fen)析和(he)純(chun)化(hua)，可用(yong)于合成(cheng)寡核(he)(he)(he)苷酸分(fen)析和(he)純(chun)化(hua)、RNA 酶(mei)保(bao)護實驗、體(ti)外轉(zhuan)錄(lu)研究和(he) RNA 印跡實驗等(deng)。是一(yi)(yi)款安全、快捷、高(gao)(gao)性能的(de)預制(zhi)凝膠，即開即用(yong)無需自行配置各種試劑及灌膠操作(zuo)，采(cai)用(yong)全自動(dong)化(hua)灌膠技術，大(da)大(da)降低批間差異。核(he)(he)(he)酸條帶均一(yi)(yi)性好(hao)，分(fen)辨率高(gao)(gao)。兼容市場上主流的(de) mini 電泳槽， 如(ru) Bio-Rad，天能，六(liu)一(yi)(yi)和(he)君意東(dong)方(fang)等(deng)。

產品參(can)數(shu)：

預制膠板尺寸(cun)：長 9.8 cm，寬(kuan)8.4 cm，厚度為4.1 mm

預制膠尺寸：長 8.1 cm，寬  7.4 cm，厚度(du)為1.1 mm

梳孔(kong)：12 孔(kong)

包裝規格(ge)：10板(ban)/盒

最大上樣量：30 μl（12 孔）

● 產品貨號(hao)及選(xuan)擇：

● 貯存、效期及運輸：

    預制膠4-8℃貯存，切勿置于0oC以(yi)下冷凍；有效(xiao)期30天；常(chang)溫(wen)運輸(shu)。

● 使用說明：

一. 樣品準(zhun)備：

1.1單鏈DNA樣(yang)(yang)(yang)品加(jia)入等體積的(de)2×TBE尿(niao)素(su)上樣(yang)(yang)(yang)緩沖(chong)液(ye)（用于尿(niao)素(su)變(bian)性膠(jiao)）（貨號：DL080）；RNA樣(yang)(yang)(yang)品加(jia)入等體積的(de)2×RNA上樣(yang)(yang)(yang)緩沖(chong)液(ye) (尿(niao)素(su)變(bian)性膠(jiao)，RNase-free) （貨號：RTE4103-05）；70℃孵育5分鐘以充分變(bian)性核酸以打開核酸的(de)二級結構(gou)，立即置于冰水浴中(zhong)。 建議每孔(kong)上樣(yang)(yang)(yang)0.2-0.5 μg左右即可。

1.2 TBE-尿素-PAGE電泳可以選(xuan)擇單鏈(lian)DNA Marker（25-75 nt）（貨(huo)號(hao)(hao)：RTM501）或單鏈(lian)DNA Marker （15-120nt）（貨(huo)號(hao)(hao)：RTM506）或單鏈(lian)DNA Marker（10-75 nt）預混(hun)型（貨(huo)號(hao)(hao)：RTM 508）作為分子量標準。

二. 電(dian)泳液的準備：

取(qu) 5×TBE（貨(huo)號：TB001），加入去離子水稀(xi)釋為1×，制備成 1×TBE buffer。對于RNA樣品電泳，取5×TBE（RNase-free）（貨號(hao)：TB001F），加入RNase-free水/DEPC水（貨號(hao)：RF001-02）稀釋為 1×，制(zhi)備成  1×TBE buffer。

1×TBE電(dian)泳(yong)緩沖液配制方法

三(san). 電泳：

3.1 將(jiang)預制膠從包(bao)裝袋中取出(chu)，裝入(ru)兼容的電(dian)泳槽中，加入(ru)電(dian)泳緩(huan)沖(chong)液(ye)，再緩(huan)慢地將(jiang)梳子拔出(chu)。

注：伯樂(le)Mini III或Mini-PROTEAN Tetra Cell，天能VE-180，六一24K系列電泳槽請確保密封(feng)條的安裝方(fang)向（下圖）。

六一其(qi)他系列，君意東(dong)方JY-SCZ2/4，百晶BG-verMINI，Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280)等電(dian)泳槽可以直接使用預制膠。不兼容Thermol系列電(dian)泳槽。

3.2內槽(cao)加滿電(dian)(dian)泳液(ye)，外槽(cao)加入電(dian)(dian)泳液(ye)沒過電(dian)(dian)泳槽(cao)底部的陽極(ji)即可(ke)，用1×TBE緩沖(chong)液(ye)徹(che)底(di)沖(chong)洗加樣孔2-3次，去除(chu)殘余的尿素。

3.3 上(shang)樣：在梳孔內(nei)加入適(shi)當濃度和體積的(de)樣品。

注(zhu)：最佳上樣(yang)量須通過實驗來確(que)定，樣(yang)品(pin)過量較(jiao)易導致條帶(dai)拖(tuo)尾。

3.4 將電(dian)(dian)泳(yong)槽(cao)蓋(gai)子蓋(gai)好，并將電(dian)(dian)源線插(cha)頭插(cha)入電(dian)(dian)泳(yong)儀電(dian)(dian)源插(cha)孔(kong)(紅對紅，黑對黑)。一般(ban)在150V電(dian)(dian)壓，電(dian)(dian)泳(yong)50-90分鐘，根據溴酚藍的位置大體判(pan)斷條帶(dai)大小位置，停止電(dian)(dian)泳(yong)。

3.5 取出玻璃(li)膠板(ban)，稍加用力慢慢扳(ban)開(kai)或用刮板(ban)輕輕撬開(kai)玻璃(li)膠板(ban)，將(jiang)凝(ning)膠取出。

四. 染色：

單鏈(lian)DNA或RNA樣(yang)品可以(yi)用(yong)單鏈(lian)DNA PAGE電泳染(ran)色試劑盒(he)（貨(huo)號(hao)(hao)：RTS5103），核酸(suan)PAGE電泳染(ran)色試劑盒(he)（貨(huo)號(hao)(hao)：RTS5102）或核酸(suan)快速(su)高靈敏度染(ran)色試劑盒(he)（貨(huo)號(hao)(hao)：RTS5101）染(ran)色均(jun)可以(yi)得到清晰的條帶分離(li)效果(guo)。注：如果(guo)使(shi)用(yong)核酸(suan)染(ran)料(liao)(liao)染(ran)色，RealSafe Red（貨(huo)號(hao)(hao)：GR002）或RealSafe All（貨(huo)號(hao)(hao)：GR004）核酸(suan)染(ran)料(liao)(liao)結(jie)合單鏈(lian)核酸(suan)效果(guo)最(zui)佳，強烈建(jian)議使(shi)用(yong)以(yi)便獲得最(zui)佳效果(guo)的膠圖(tu)。其(qi)余染(ran)料(liao)(liao)如GelRed，Goldview，EB等染(ran)色效果(guo)不好。

以下程序用RealSafe Red核酸染料(貨號(hao):GR002)進行(xing)染色(se)。

4.1  漂洗：拆下凝(ning)膠后，適量蒸(zheng)餾水(shui)漂洗3-5分鐘(zhong)。

4.2  染(ran)色液(ye)配制：

4.3 染色：

凝膠浸泡于(yu)即用(yong)型染色液中(zhong)，常(chang)溫避(bi)光搖床40-60 rpm  染色30 分鐘。

4.4 觀察：

紫外燈或藍(lan)光(guang)儀(yi)上觀察(cha)條(tiao)帶。

● 實驗(yan)示例：