植物凝膠(jiao)(Phytagel)
●產(chan)品簡介:
Phytagel又名(ming)Gellan gum,Gelrite。是一種瓊脂的替代物(wu),是細菌(假單(dan)孢菌Pseudomonas elodea)經(jing)過發(fa)酵生產(chan)的(de),含有葡(pu)萄糖醛酸(suan)、鼠李糖和葡(pu)萄糖等物(wu)(wu)(wu)(wu)質(zhi),具(ju)有無(wu)色(se)、透亮和高韌(ren)性的(de)特(te)點,是配制植(zhi)物(wu)(wu)(wu)(wu)組(zu)(zu)織(zhi)培(pei)養基和微生物(wu)(wu)(wu)(wu)培(pei)養基的(de)主(zhu)要成(cheng)分(fen)。由于(yu)其克服了(le)傳(chuan)統瓊(qiong)脂在植(zhi)物(wu)(wu)(wu)(wu)組(zu)(zu)織(zhi)培(pei)養中的(de)固(gu)有缺(que)陷為植(zhi)物(wu)(wu)(wu)(wu)學(xue)研究帶來了(le)一場新的(de)革命,已經(jing)成(cheng)為了(le)國際公認的(de)植(zhi)物(wu)(wu)(wu)(wu)組(zu)(zu)培(pei)首選產(chan)品。
●常用工作濃度:
植(zhi)物培養基中(zhong)1.5-2.5g/L;微生物培養基中(zhong)10g/L。
●優點:
1. 高透明度:It offers clear solid medium after gelling due to a higher clarity than agar allowing easy observation inside the medium.
2. 用量更(geng)少(shao):A smaller amount of gellan gum offers gel strength equal to agar.
3. 促進生長(chang):It can accelerate growth rate of plant bodies.
●使用(yong)注意事(shi)項:
1. 植物凝膠不易溶解于冷水中,滅(mie)菌(jun)前請搖勻。
2. 植物凝膠的凝固程度主要與三個因素有關:
a 離(li)子(zi)強度(du):Phytagel的凝固(gu)需要陽離子尤其是二(er)價陽離子的存在。一(yi)般植物培養基中(zhong)的鈣(gai)離子和鎂離子的濃(nong)度足以讓phytagel凝固(gu)。微生(sheng)物學研究(jiu)所用的低(di)鹽培養基中(zhong)為(wei)了使Phytagel凝固(gu),通常需要另(ling)外加入鈣(gai)鹽、鎂鹽或使用高濃(nong)度的Phytagel。
b 培養基的pH值(zhi):pH5.8是其(qi)凝固(gu)的(de)(de)最適pH值,pH低(di)于(yu)(yu)5.8不易凝固(gu)。由(you)于(yu)(yu)高壓滅菌(jun)會(hui)使(shi)培養(yang)基的(de)(de)pH降(jiang)低(di)0.3-0.5單(dan)位,因此(ci)滅菌(jun)前培養(yang)基的(de)(de)pH值要用MES和KOH調節到pH5.8,由(you)于(yu)(yu)MES的(de)(de)緩沖能力(li),滅菌(jun)后不會(hui)使(shi)pH降(jiang)低(di)。建議MES 1升(sheng)培養(yang)基中加0.5克(終濃(nong)度為(wei)2.5 mM)
注:培養基中加入植物凝膠后,用KOH調節pH到5.8。避免先調節pH后加植物凝膠,因為植物凝膠會影響培養基的pH。
c 凝膠用量:一般說來,對大多數(shu)植物培養基來說,1升(sheng)培養基中(zhong)凝(ning)膠(jiao)用(yong)(yong)量(liang)(liang)3g(0.3%)足矣。特殊要求請適當(dang)調(diao)整凝(ning)膠(jiao)用(yong)(yong)量(liang)(liang)。
附錄:植物凝(ning)膠(jiao)與瓊脂使用對比(bi)
|
[Ca2+]
|
[Mg2+]
|
Phytagel
|
Agar
|
pH
|
MS培養基
|
2.99mM
|
1.50mM
|
0.3%
|
1%
|
5.8
|
1/2 MS培(pei)養基(ji)
|
1.495mM
|
0.75mM
|
0.6%
|
1%
|
5.8
|
細菌培(pei)養
|
-
|
-
|
1%
|
1.5%
|
-
|
Reference:
1 Genes involved in cytokinin signal transduction. Kakimoto T. J. Plant. Res. 1998,Vol. 111, 2,261-265.