植(zhi)物(wu)凝膠(Phytagel)
●產品簡介:
Phytagel又名Gellan gum,Gelrite。是一種瓊脂的替代(dai)物,是細菌(假單(dan)孢菌Pseudomonas elodea)經過(guo)發酵生產的(de)(de),含有葡萄糖(tang)醛酸、鼠李糖(tang)和(he)(he)葡萄糖(tang)等物(wu)質(zhi),具(ju)有無色、透亮和(he)(he)高(gao)韌性(xing)的(de)(de)特點(dian),是(shi)配制植(zhi)物(wu)組織培養基和(he)(he)微生物(wu)培養基的(de)(de)主要成(cheng)分。由(you)于其克服了傳統(tong)瓊脂(zhi)在植(zhi)物(wu)組織培養中的(de)(de)固有缺陷為植(zhi)物(wu)學研究帶來了一場新的(de)(de)革命,已經成(cheng)為了國際公認(ren)的(de)(de)植(zhi)物(wu)組培首選(xuan)產品。
●常(chang)用工(gong)作濃度:
植物培養(yang)基中1.5-2.5g/L;微生物培養(yang)基中10g/L。
●優點:
1. 高透明(ming)度(du):It offers clear solid medium after gelling due to a higher clarity than agar allowing easy observation inside the medium.
2. 用量更少:A smaller amount of gellan gum offers gel strength equal to agar.
3. 促進生(sheng)長:It can accelerate growth rate of plant bodies.
●使用注意(yi)事項:
1. 植物凝膠不易(yi)溶解于冷水中,滅菌前請搖勻。
2. 植(zhi)物(wu)凝膠的凝固程度主要與三個因(yin)素(su)有關:
a 離子強度:Phytagel的(de)凝(ning)固需要(yao)陽(yang)離子尤其是(shi)二價陽(yang)離子的(de)存在。一(yi)般(ban)植物培(pei)養基中的(de)鈣(gai)離子和鎂離子的(de)濃(nong)度足以讓phytagel凝(ning)固。微(wei)生(sheng)物學研究所用的(de)低鹽培(pei)養基中為(wei)了(le)使(shi)Phytagel凝(ning)固,通常需要(yao)另外加入鈣(gai)鹽、鎂鹽或使(shi)用高濃(nong)度的(de)Phytagel。
b 培養(yang)基的pH值:pH5.8是(shi)其凝(ning)固(gu)的最適pH值(zhi),pH低于(yu)5.8不易凝(ning)固(gu)。由于(yu)高壓滅菌會使(shi)培(pei)養基(ji)(ji)的pH降低0.3-0.5單(dan)位,因此(ci)滅菌前培(pei)養基(ji)(ji)的pH值(zhi)要用MES和KOH調節到pH5.8,由于(yu)MES的緩(huan)沖能力,滅菌后不會使(shi)pH降低。建議(yi)MES 1升培(pei)養基(ji)(ji)中加0.5克(ke)(終濃度為(wei)2.5 mM)
注:培養基中加入植物凝膠后,用KOH調節pH到5.8。避免先調節pH后加植物凝膠,因為植物凝膠會影響培養基的pH。
c 凝膠用(yong)量(liang):一般(ban)說(shuo)來,對大多數植物培(pei)養基(ji)來說(shuo),1升(sheng)培(pei)養基(ji)中(zhong)凝膠(jiao)(jiao)用(yong)量3g(0.3%)足矣。特殊要求請適當調整凝膠(jiao)(jiao)用(yong)量。
附錄:植物凝膠與瓊(qiong)脂使用對比
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[Ca2+]
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[Mg2+]
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Phytagel
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Agar
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pH
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MS培養(yang)基
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2.99mM
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1.50mM
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0.3%
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1%
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5.8
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1/2 MS培(pei)養(yang)基
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1.495mM
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0.75mM
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0.6%
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1%
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5.8
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細(xi)菌培養
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-
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-
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1%
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1.5%
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-
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Reference:
1 Genes involved in cytokinin signal transduction. Kakimoto T. J. Plant. Res. 1998,Vol. 111, 2,261-265.