植物凝膠(Phytagel)
●產品簡介:
Phytagel又名(ming)Gellan gum,Gelrite。是一(yi)種瓊(qiong)脂的替代物,是細菌(jun)(假單(dan)孢菌(jun)Pseudomonas elodea)經過發酵生產的(de),含有(you)葡萄糖醛酸、鼠(shu)李糖和葡萄糖等物(wu)(wu)(wu)(wu)質,具有(you)無色、透亮和高韌性的(de)特點(dian),是配制植物(wu)(wu)(wu)(wu)組織(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)和微生物(wu)(wu)(wu)(wu)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)主(zhu)要成分(fen)。由于其(qi)克(ke)服了(le)傳統瓊脂在植物(wu)(wu)(wu)(wu)組織(zhi)培(pei)養(yang)中的(de)固(gu)有(you)缺陷為(wei)植物(wu)(wu)(wu)(wu)學(xue)研究帶來了(le)一(yi)場新的(de)革命,已經成為(wei)了(le)國際公認的(de)植物(wu)(wu)(wu)(wu)組培(pei)首選產品(pin)。
●常(chang)用工(gong)作(zuo)濃度:
植物(wu)培養基(ji)中1.5-2.5g/L;微(wei)生(sheng)物(wu)培養基(ji)中10g/L。
●優點:
1. 高透(tou)明(ming)度:It offers clear solid medium after gelling due to a higher clarity than agar allowing easy observation inside the medium.
2. 用量更少(shao):A smaller amount of gellan gum offers gel strength equal to agar.
3. 促(cu)進生長:It can accelerate growth rate of plant bodies.
●使用注意事項(xiang):
1. 植物凝(ning)膠不易(yi)溶解于冷水中,滅菌前(qian)請搖(yao)勻。
2. 植物凝膠的凝固(gu)程度(du)主要與三個(ge)因素有關:
a 離子強(qiang)度:Phytagel的(de)凝(ning)固需(xu)要陽離(li)子(zi)尤其是(shi)二價陽離(li)子(zi)的(de)存在。一般植(zhi)物(wu)(wu)培養基中(zhong)的(de)鈣(gai)離(li)子(zi)和鎂離(li)子(zi)的(de)濃度足(zu)以讓phytagel凝(ning)固。微生物(wu)(wu)學(xue)研究所用的(de)低鹽培養基中(zhong)為了使Phytagel凝(ning)固,通(tong)常需(xu)要另外(wai)加入鈣(gai)鹽、鎂鹽或使用高(gao)濃度的(de)Phytagel。
b 培養基(ji)的(de)pH值:pH5.8是其凝(ning)固的(de)最(zui)適pH值,pH低(di)(di)于(yu)5.8不(bu)易凝(ning)固。由(you)于(yu)高壓滅(mie)菌會使培(pei)養(yang)基的(de)pH降低(di)(di)0.3-0.5單位,因此滅(mie)菌前培(pei)養(yang)基的(de)pH值要用MES和KOH調節到pH5.8,由(you)于(yu)MES的(de)緩沖能力,滅(mie)菌后不(bu)會使pH降低(di)(di)。建議MES 1升培(pei)養(yang)基中加(jia)0.5克(終濃度為2.5 mM)
注:培養基中加入植物凝膠后,用KOH調節pH到5.8。避免先調節pH后加植物凝膠,因為植物凝膠會影響培養基的pH。
c 凝膠(jiao)用(yong)量:一般說(shuo)(shuo)來,對大(da)多數植物培養基來說(shuo)(shuo),1升培養基中凝(ning)膠用量3g(0.3%)足矣。特(te)殊(shu)要求請適當調(diao)整凝(ning)膠用量。
附(fu)錄(lu):植物(wu)凝膠與瓊脂使用(yong)對比(bi)
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[Ca2+]
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[Mg2+]
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Phytagel
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Agar
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pH
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MS培(pei)養基
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2.99mM
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1.50mM
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0.3%
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1%
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5.8
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1/2 MS培養基
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1.495mM
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0.75mM
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0.6%
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1%
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5.8
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細(xi)菌培養
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-
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-
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1%
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1.5%
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-
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Reference:
1 Genes involved in cytokinin signal transduction. Kakimoto T. J. Plant. Res. 1998,Vol. 111, 2,261-265.