Anti-PCNA抗(kang)體(ti)（鼠單抗(kang)）
Anti-PCNA Antibody（Monoclonal Antibody from Mouse）
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產品(pin)編號
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產(chan)品名稱
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規格
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APM5012
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Anti-PCNA抗體(ti)（鼠單抗）
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50 μl
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● 產品簡介
增(zeng)殖(zhi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)核抗(kang)原（Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA）由Miyachi等于1978年在(zai)(zai)(zai)(zai) SLE（系(xi)(xi)統性(xing)(xing)紅斑狼瘡）患者的(de)(de)(de)(de)血清中(zhong)首(shou)次(ci)發現并(bing)命名(ming)，因其只(zhi)存(cun)在(zai)(zai)(zai)(zai)于正常增(zeng)殖(zhi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)及腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)內(nei)而得名(ming)，以后的(de)(de)(de)(de)研究發現PCNA與(yu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)DNA合(he)成(cheng)關系(xi)(xi)密切，在(zai)(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)增(zeng)殖(zhi)的(de)(de)(de)(de)啟(qi)動(dong)上(shang)起(qi)(qi)重要作用，是反映(ying)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)增(zeng)殖(zhi)狀態的(de)(de)(de)(de)良好指標(biao)。PCNA是一種(zhong)分子量為36 kD的(de)(de)(de)(de)蛋(dan)白質(zhi)，在(zai)(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)核內(nei)合(he)成(cheng)，并(bing)存(cun)在(zai)(zai)(zai)(zai)于細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)核內(nei)，為DNA聚合(he)酶(mei)δ的(de)(de)(de)(de)輔助蛋(dan)白，該蛋(dan)白對聚合(he)酶(mei)的(de)(de)(de)(de)持(chi)續合(he)成(cheng)能力起(qi)(qi)重要作用。在(zai)(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)核內(nei)存(cun)在(zai)(zai)(zai)(zai)可溶(rong)(rong)性(xing)(xing)與(yu)不溶(rong)(rong)性(xing)(xing)兩種(zhong)PCNA，可溶(rong)(rong)性(xing)(xing)PCNA在(zai)(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)周期各期中(zhong)均有(you)表(biao)達(da)，其量在(zai)(zai)(zai)(zai)DNA合(he)成(cheng)過程中(zhong)不發生(sheng)明顯(xian)變化，易(yi)被去污劑(ji)(ji)提取、甲醇破(po)壞(huai)；不溶(rong)(rong)性(xing)(xing)PCNA較穩(wen)定，不易(yi)被去污劑(ji)(ji)洗脫、甲醇破(po)壞(huai)，這種(zhong)PCNA在(zai)(zai)(zai)(zai)G0～G1期細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)中(zhong)無明顯(xian)表(biao)達(da)，G1晚期，其表(biao)達(da)大幅度增(zeng)加，S期達(da)到高峰(feng)，G2～M期明顯(xian)下降，其量的(de)(de)(de)(de)變化與(yu)DNA合(he)成(cheng)一致(zhi)，檢(jian)測其在(zai)(zai)(zai)(zai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)中(zhong)的(de)(de)(de)(de)表(biao)達(da)，可作為評價細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)增(zeng)殖(zhi)狀態的(de)(de)(de)(de)一個指標(biao)。
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來源
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用途及稀釋比例
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抗體類型
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PCNA分子量
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Mouse
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WB 1:2000-5000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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單克隆抗體(ti)
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36 kD
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注：WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence
本(ben)抗體如(ru)果用于常規的Western檢測(ce)，至(zhi)少可以檢測(ce)50次。
● 貯存形式：
穩定(ding)溶(rong)液，1 mg/ml抗(kang)體溶(rong)于PBS，50%甘油，pH7.2。
● 保存及運輸條件：
-20℃保存，一(yi)年有效；避免(mian)反復凍融；濕冰運輸。
● 使用說明：
1. Western Blot雜交(ECL顯(xian)色)：1:2000-5000稀釋，常溫孵育1-2 h或4℃過(guo)夜(ye)。
2. 免疫熒光（IF）和免疫組化（IHC）：1:200-1000稀釋。
● 實驗示例：
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lane 1，5：ECL Marker；lane 2：總蛋(dan)白TP；lane 3：細胞漿蛋(dan)白，C-Pr；lane 4：細胞核蛋(dan)白，N-Pr
Jurkat蛋白提取：總蛋用RIPA（貨號：RL1020 ）提取。胞漿蛋白和核蛋白用動物細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑盒（貨號：RTD8301）提取。
制膠和電泳：RealPAGE plus彩色凝膠快速制備試劑盒（貨號：RTD6132-15）；200 V 55 min
轉膜：NC膜，1×RealBlot快速轉膜液 400 mA 37 min
封閉：Western無蛋白快速封閉液（貨號：PF1070） RT封閉 20 min
一抗： Anti-PCNA抗體（鼠(shu)單抗）（貨號：APM5012） 1：5000
二抗：HRP標記羊抗鼠IgG（貨號：HGM1060）1：5000
ECL發光：RealECL發光液（貨號：EC2520）；化學發光成像系統（貨號：RT523）拍照。