海角国精产品三区二区三区,91精品国产综合久久福利,国产精品无码亚一区二区三区,国产成人精品免费视频www,偷拍视频对白不卡高清精品

Tris-Tricine-PAGE凝膠制備及電泳試劑盒（適用于多肽電泳）     說明書Ver 740056

● 產品組成：

● 產品簡介：

該(gai)產(chan)品含有(you)多肽電泳全套試劑，可以用來檢測2.5-20 kD的(de)多肽大小。本試劑盒可配制(zhi)至少25塊常規(gui)大小（8×10cm）,厚(hou)度(du)1 mm的(de)PAGE膠。該(gai)產(chan)品具(ju)有(you)以下(xia)特點(dian)：

1 分辨率高：凝膠(jiao)緩沖液(ye)獨特配方，可以有(you)效分離2.5-5 kD多肽；

2 使用方便：配制凝(ning)膠(jiao)(jiao)時只(zhi)需1:1混合濃縮膠(jiao)(jiao)或分離膠(jiao)(jiao)溶液，不(bu)用計算；

3 易于上樣(yang)：紅色濃縮膠，易于觀(guan)察加樣(yang)孔，上樣(yang)方便。

● 貯存、運輸及效期：

按照標簽溫度貯存；常溫運輸；有效期一年。

● 使用說明：

一. 10%APS溶液配制：

10% APS為固體粉末，使用前加入5 ml雙蒸水溶(rong)(rong)解即(ji)配制成(cheng)10% APS溶(rong)(rong)液(ye)(ye)(ye)，將溶(rong)(rong)液(ye)(ye)(ye)分裝后置于-20℃保存，通常一年(nian)內(nei)有(you)效。該(gai)溶(rong)(rong)液(ye)(ye)(ye)在4℃條件下可(ke)以穩定保存兩周。若發現凝膠聚合時間延長(chang)，應考(kao)慮(lv)更(geng)換(huan)使用-20℃保存的(de)10% APS溶(rong)(rong)液(ye)(ye)(ye)。

二. 制膠：

1. 配制分離膠:

1.1按照表一將(jiang)不同(tong)體積(ji)的成分加(jia)入到小燒杯中混(hun)合(he)；立即混(hun)勻(yun)5-10秒，以使溶液充分混(hun)勻(yun)。                    表1 （一塊1 mmmini膠用量(liang)）*

注(zhu)： * 如非(fei)必(bi)須(xu)，不(bu)要使(shi)用(yong)(yong)厚度(du)1.5 mm的(de)(de)凝(ning)膠，盡量使(shi)用(yong)(yong)厚度(du)1 mm的(de)(de)凝(ning)膠，這樣(yang)會減少電泳后(hou)染色(se)和脫(tuo)色(se)的(de)(de)時間。

1.2 在玻璃板(ban)中迅速灌入(ru)適量分離膠溶液，使液面(mian)和短(duan)玻璃板(ban)上(shang)沿之間的距離比梳齒長0.5 cm即可。注：此溶液為過(guo)量，請(qing)勿全部注入(ru)。

1.3 然后(hou)在分離(li)膠溶液上輕(qing)輕(qing)覆蓋一層1-2 cm的無水乙(yi)醇層，使凝(ning)膠表面保(bao)持平(ping)整。

1.4 靜置(zhi)10-30分鐘(zhong)，待(dai)分離膠和乙醇層之間出現一個清晰的界面(mian)表示(shi)凝膠已聚合。

注：凝膠的聚合(he)時(shi)間與環境(jing)溫度有關。夏(xia)天溫度較高時(shi)，聚合(he)較快；冬天氣溫低時(shi)，聚合(he)時(shi)間會延(yan)長。可以根(gen)據表1的標(biao)準(zhun)條件調節(jie)促凝劑的加(jia)入(ru)量。分離膠25℃條件下，約(yue)20分鐘可以聚合(he)。

2. 配制濃縮膠:

去除覆蓋在分離膠上的乙醇層，用濾紙將殘留的乙醇吸去。

2.1 按照表一將不同成分加入到小燒杯中混合；立即混勻5-10秒，以使溶液充分混勻。

2.2 將梳子插入凝膠內，避免產生氣泡。

2.3 靜置30-50分鐘待凝膠聚合。

注：凝膠的聚合時間與環境溫度有關。夏天溫度較高時，聚合較快；冬天氣溫低時，聚合時間會延長。可以根據表1的標準條件調節促凝劑的加入量。濃縮膠25℃條件下，約40分鐘可以聚合。

三. 電泳：

3.1 變性電泳緩沖液和樣品配制：

3.1.1 10×Tris-Tricine- SDS緩沖(chong)液配制：

將10×Tris-Tricine -SDS緩沖(chong)液（10×TTS）粉末(mo)（Cat No：CB010P）置于一(yi)干凈的燒杯中(zhong)，加入(ru)500 ml超純水，徹底攪拌(ban)混勻，不要調節(jie)pH，即配成500ml 10×TTS緩沖(chong)液。超純水稀釋10倍配成1×Tris-Tricine -SDS緩沖(chong)液。

注：伯樂Mini III電(dian)泳槽一次電(dian)泳使用(yong)300-350 ml 1×TTS緩沖液。

3.1.2 變性樣(yang)品處(chu)理(li)：

        待上樣的檢測樣品與2×Tricine上樣緩沖液（變性，還原）[Cat No：TP050]等體積混合，95℃處理5分鐘后上樣。蛋白Marker一般已經含有上樣緩沖液，根據說明書上樣（預染Marker不能加熱處理，非預染Marker上樣前一般要95℃處理5分鐘）。

3.2 非變性電泳緩沖液配制和樣品配制：

3.2.1 10×Tris-Tricine緩(huan)沖液配制(zhi)：

將10×Tris-Tricine緩(huan)沖液（10×TT）粉末(mo)[Cat No:CB020P]（試(shi)劑盒不提供）置(zhi)于一(yi)干凈的(de)燒杯中(zhong)，加入500 ml超(chao)純水，徹底攪拌混勻，不要調節(jie)pH，即配成(cheng)500 ml 10×TT緩(huan)沖液。超(chao)純水稀(xi)釋(shi)10倍配成(cheng)1×Tris-Tricine緩(huan)沖液。

注(zhu)：伯樂Mini III電泳槽一次電泳使用300-350 ml 1×TT緩沖液。

3.2.2 非變性樣品處理：

      待上樣的檢測樣品與2×Tricine上樣緩沖液（非(fei)變性，非(fei)還(huan)原(yuan)）[Cat No:TP070] （試劑盒不(bu)提(ti)供）等體積混合，不(bu)要加熱，直接上樣。

3.3 電泳：

將電泳(yong)(yong)(yong)槽的內槽加(jia)滿(man)電泳(yong)(yong)(yong)緩沖液，輕柔拔出(chu)梳子(zi)，用1 ml移(yi)液器將梳孔吹洗干凈，將Marker或蛋白樣(yang)品(pin)加(jia)入(ru)點樣(yang)孔，穩壓電泳(yong)(yong)(yong)（表2），至(zhi)藍色考馬斯亮藍指示(shi)前(qian)沿至(zhi)分(fen)離膠下沿位(wei)置時即(ji)可停止電泳(yong)(yong)(yong)。整個電泳(yong)(yong)(yong)過程大約需要2.5-3個小時。

表2 多肽電泳條件

注：穩壓電(dian)(dian)泳，電(dian)(dian)流不用調節，記錄(lu)電(dian)(dian)流數值在推薦范(fan)圍內(nei)，電(dian)(dian)泳過程中電(dian)(dian)流會逐漸降(jiang)低。

四. 染色：

 實驗示例：